Inhibition of HO-1 enzymatic activity impairs head and neck cancer cell survival
- Autores
- Mascaró, Marilina; Alonso, Exequiel Gonzalo; Schweitzer, Karen; Fernández Chávez, Lucía; Ferronato, María Julia; Ibarra, Agustina; Colo, Georgina Pamela; Giorgi, Gisela; Curino, Alejandro Carlos; Facchinetti, Maria Marta
- Año de publicación
- 2021
- Idioma
- inglés
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- We have previously reported that, in human HNSCC samples, hemeoxygenase-1 (HO-1) mRNA expression is up-regulated and it is associated with worst survival. We also reported an up-regulation of HO-1 protein levels and that it is localized in the cytoplasmic and nuclear compartments. Moreover, we demonstrated that pharma- cological activation of HO-1 by hemin and genetic full-length HO-1 (FL-HO-1) overexpression increases HN13 cells survival and cell cycle progression, suggesting a protumor role of HO-1 in HNSCC. However, whether byproducts of HO-1 enzymatic activity are in- volved in FL-HO-1 mediated-effects remains unknown. In this study, we aimed to elucidate if inhibition of HO-1 enzymatic activity impacts on head and neck cancer cells behavior. To that end, HO-1 activity was inhibited pharmacologically using ZnPP and an enzymatically inactive FL-H25A-HO1-overexpressing HN13 cell line was estab- lished. We evaluated HO-1 expression by western blot and indirect immunofluorescence, cell viability by crystal violet, cell proliferation by manual cell counting, cell cycle progression by propidium iodide staining and flow cytometry, and cell migration by wound healing assay. We found that 10 μM ZnPP impaired cell viability (p<0,001 vs DMSO) at 48h and 72h as well as it diminished cell number at 72h (p<0,01 vs DMSO). Also, in such conditions, ZnPP induces overex- pression of HO-1, which is localized in the cytoplasm. In line with the previously mentioned, we found that FL-H25A-HO1 HN13 cells have a lower growth rate (p<0,001) than FL-HO1 HN13 cells. We also found that the population of FL-H25A-HO1 HN13 cells have an increase in Go/G1 phase (p<0,01) and a decrease in G2/M phase (p<0,05) compared with FL-HO1 HN13 cells. Related to cell migra- tion, FL-H25A-HO1 failed to alter migratory capacity (p>0,05 vs FL- HO1). In conclusion, our results show that the enzymatic activity of HO-1 plays a role in the FL-HO-1-mediated effects on head and neck cancer cell survival.
Fil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Alonso, Exequiel Gonzalo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Schweitzer, Karen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Fernández Chávez, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Ferronato, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Ibarra, Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Colo, Georgina Pamela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Giorgi, Gisela. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Cátedra de Fisiología Humana; Argentina
Fil: Curino, Alejandro Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Facchinetti, Maria Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
LXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; LIII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental y XI Reunión Anual De La Asociación Argentina De Nanomedicinas
Buenos Aires
Argentina
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However, whether byproducts of HO-1 enzymatic activity are in- volved in FL-HO-1 mediated-effects remains unknown. In this study, we aimed to elucidate if inhibition of HO-1 enzymatic activity impacts on head and neck cancer cells behavior. To that end, HO-1 activity was inhibited pharmacologically using ZnPP and an enzymatically inactive FL-H25A-HO1-overexpressing HN13 cell line was estab- lished. We evaluated HO-1 expression by western blot and indirect immunofluorescence, cell viability by crystal violet, cell proliferation by manual cell counting, cell cycle progression by propidium iodide staining and flow cytometry, and cell migration by wound healing assay. We found that 10 μM ZnPP impaired cell viability (p<0,001 vs DMSO) at 48h and 72h as well as it diminished cell number at 72h (p<0,01 vs DMSO). Also, in such conditions, ZnPP induces overex- pression of HO-1, which is localized in the cytoplasm. In line with the previously mentioned, we found that FL-H25A-HO1 HN13 cells have a lower growth rate (p<0,001) than FL-HO1 HN13 cells. We also found that the population of FL-H25A-HO1 HN13 cells have an increase in Go/G1 phase (p<0,01) and a decrease in G2/M phase (p<0,05) compared with FL-HO1 HN13 cells. Related to cell migra- tion, FL-H25A-HO1 failed to alter migratory capacity (p>0,05 vs FL- HO1). In conclusion, our results show that the enzymatic activity of HO-1 plays a role in the FL-HO-1-mediated effects on head and neck cancer cell survival.Fil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Alonso, Exequiel Gonzalo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Schweitzer, Karen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Fernández Chávez, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Ferronato, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Ibarra, Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Colo, Georgina Pamela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Giorgi, Gisela. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Cátedra de Fisiología Humana; ArgentinaFil: Curino, Alejandro Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Facchinetti, Maria Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaLXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; LIII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental y XI Reunión Anual De La Asociación Argentina De NanomedicinasBuenos AiresArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaSociedad Argentina de InmunologíaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalAsociación Argentina de NanomedicinasFundación Revista Medicina2021info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/conferenceObjectReuniónJournalhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/184970Inhibition of HO-1 enzymatic activity impairs head and neck cancer cell survival; LXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; LIII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental y XI Reunión Anual De La Asociación Argentina De Nanomedicinas; Buenos Aires; Argentina; 2021; 206-2061669-9106CONICET DigitalCONICETenginfo:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.saic.org.ar/revista-medicinaInternacionalinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/reponame:CONICET Digital (CONICET)instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas2025-09-29T09:34:08Zoai:ri.conicet.gov.ar:11336/184970instacron:CONICETInstitucionalhttp://ri.conicet.gov.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://ri.conicet.gov.ar/oai/requestdasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:34982025-09-29 09:34:08.936CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicasfalse |
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We have previously reported that, in human HNSCC samples, hemeoxygenase-1 (HO-1) mRNA expression is up-regulated and it is associated with worst survival. We also reported an up-regulation of HO-1 protein levels and that it is localized in the cytoplasmic and nuclear compartments. Moreover, we demonstrated that pharma- cological activation of HO-1 by hemin and genetic full-length HO-1 (FL-HO-1) overexpression increases HN13 cells survival and cell cycle progression, suggesting a protumor role of HO-1 in HNSCC. However, whether byproducts of HO-1 enzymatic activity are in- volved in FL-HO-1 mediated-effects remains unknown. In this study, we aimed to elucidate if inhibition of HO-1 enzymatic activity impacts on head and neck cancer cells behavior. To that end, HO-1 activity was inhibited pharmacologically using ZnPP and an enzymatically inactive FL-H25A-HO1-overexpressing HN13 cell line was estab- lished. We evaluated HO-1 expression by western blot and indirect immunofluorescence, cell viability by crystal violet, cell proliferation by manual cell counting, cell cycle progression by propidium iodide staining and flow cytometry, and cell migration by wound healing assay. We found that 10 μM ZnPP impaired cell viability (p<0,001 vs DMSO) at 48h and 72h as well as it diminished cell number at 72h (p<0,01 vs DMSO). Also, in such conditions, ZnPP induces overex- pression of HO-1, which is localized in the cytoplasm. In line with the previously mentioned, we found that FL-H25A-HO1 HN13 cells have a lower growth rate (p<0,001) than FL-HO1 HN13 cells. We also found that the population of FL-H25A-HO1 HN13 cells have an increase in Go/G1 phase (p<0,01) and a decrease in G2/M phase (p<0,05) compared with FL-HO1 HN13 cells. Related to cell migra- tion, FL-H25A-HO1 failed to alter migratory capacity (p>0,05 vs FL- HO1). In conclusion, our results show that the enzymatic activity of HO-1 plays a role in the FL-HO-1-mediated effects on head and neck cancer cell survival. Fil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina Fil: Alonso, Exequiel Gonzalo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina Fil: Schweitzer, Karen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. 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Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina Fil: Giorgi, Gisela. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Cátedra de Fisiología Humana; Argentina Fil: Curino, Alejandro Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina Fil: Facchinetti, Maria Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. 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We have previously reported that, in human HNSCC samples, hemeoxygenase-1 (HO-1) mRNA expression is up-regulated and it is associated with worst survival. We also reported an up-regulation of HO-1 protein levels and that it is localized in the cytoplasmic and nuclear compartments. Moreover, we demonstrated that pharma- cological activation of HO-1 by hemin and genetic full-length HO-1 (FL-HO-1) overexpression increases HN13 cells survival and cell cycle progression, suggesting a protumor role of HO-1 in HNSCC. However, whether byproducts of HO-1 enzymatic activity are in- volved in FL-HO-1 mediated-effects remains unknown. In this study, we aimed to elucidate if inhibition of HO-1 enzymatic activity impacts on head and neck cancer cells behavior. To that end, HO-1 activity was inhibited pharmacologically using ZnPP and an enzymatically inactive FL-H25A-HO1-overexpressing HN13 cell line was estab- lished. We evaluated HO-1 expression by western blot and indirect immunofluorescence, cell viability by crystal violet, cell proliferation by manual cell counting, cell cycle progression by propidium iodide staining and flow cytometry, and cell migration by wound healing assay. We found that 10 μM ZnPP impaired cell viability (p<0,001 vs DMSO) at 48h and 72h as well as it diminished cell number at 72h (p<0,01 vs DMSO). Also, in such conditions, ZnPP induces overex- pression of HO-1, which is localized in the cytoplasm. In line with the previously mentioned, we found that FL-H25A-HO1 HN13 cells have a lower growth rate (p<0,001) than FL-HO1 HN13 cells. We also found that the population of FL-H25A-HO1 HN13 cells have an increase in Go/G1 phase (p<0,01) and a decrease in G2/M phase (p<0,05) compared with FL-HO1 HN13 cells. Related to cell migra- tion, FL-H25A-HO1 failed to alter migratory capacity (p>0,05 vs FL- HO1). In conclusion, our results show that the enzymatic activity of HO-1 plays a role in the FL-HO-1-mediated effects on head and neck cancer cell survival. |
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