Maintenance and thermal stabilization of NADH dehydrogenase-2 conformation upon elimination of its C-terminal region

Autores
Villegas, Josefina Maria; Torres Bugeau, Clarisa Maria; Chehin, Rosana Nieves; Burgos, Martha Ines; Fidelio, Gerardo Daniel; Rintoul, Maria Regina; Rapisarda, Viviana Andrea
Año de publicación
2013
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Development of an artificial enzyme with activity and structure comparable to that of natural enzymes is an important goal in biological chemistry. Respiratory NADH dehydrogenase-2 (NDH-2) of Escherichia coli is a peripheral membrane-bound flavoprotein, belonging to a group of enzymes with scarce structural information. By eliminating the C-terminal region of NDH-2, a water soluble version with significant enzymatic activity was previously obtained. Here, NDH-2 structural features were established, in comparison to those of the truncated version. Far-UV circular dichroism, Fourier transform infrared spectroscopy and limited proteolysis analysis showed that the overall structure of both proteins was similar at 30 °C. Experimental data agree with the predicted NDH-2 structure (PDB: 1OZK). The absence of C-terminal region stabilized in ∼5–10 °C the truncated protein conformation. However, truncation impaired enzymatic activity at low temperatures, probably due to the weak interaction of the mutant protein with FAD cofactor.
Fil: Villegas, Josefina Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos (i); Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química Biológica; Argentina
Fil: Torres Bugeau, Clarisa Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química Biológica; Argentina
Fil: Chehin, Rosana Nieves. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química Biológica; Argentina
Fil: Burgos, Martha Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba (p); Argentina
Fil: Fidelio, Gerardo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba (p); Argentina
Fil: Rintoul, Maria Regina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química Biológica; Argentina
Fil: Rapisarda, Viviana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tucumán. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química Biológica; Argentina
Materia
Ndh-2
Fad
Truncated Protein
Secondary Structure
Protein Thermal Stability
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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