Avaliação da atividade hidrolítica de enzimas digestivas isoladas de Pygocentrus nattereri (Kner 1858) para potenciais aplicações tecnológicas

Autores
Medina, Daiana Mailen; Leiva, Laura Cristina Ana; Pellegrini, Luciana; Bustillo, Soledad; Acevedo Gomez, Antonella Valeria
Año de publicación
2023
Idioma
portugués
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
A pesca gera subprodutos (vísceras, pele, ossos) que em sua maioria são descartados ou se tornam produtos de baixo valor, constituindo um grave problema ambiental, sendo as vísceras uma rica fonte de enzimas digestivas, como a pepsina e tripsina. O nordeste argentino apresenta uma grande variedade de peixes, como é o caso do Pygocentrus nattereri (n.v palometa), um peixe de água doce que habita rios (23-27ºC), comumente encontrado na bacia do Paraná-Plata. Tem uma alimentação carnívora e hábitos vorazes, pelo que as suas vísceras constituem uma fonte alternativa de enzimas digestivas com potencial aplicação tecnológica, por exemplo tripsinização e produção de soros terapêuticos. A primeira consiste em confrontar a tripsina comercial com células de cultivo em monocamada para a digestão de proteínas intercelulares e de ligação célula-substrato. A segunda baseia-se na utilização de pepsinas para a produção de fragmentos F(ab´)2 a partir de imunoglobulinas IgG, reduzindo os efeitos colaterais que o fragmento FC pode induzir. O objetivo deste trabalho foi isolar as enzimas pepsina (mucosa gástrica) e tripsina (cecos pilóricos) de víscerasde palometa, a fim de avaliar suas capacidades hidrolíticas em anticorpos e culturas celulares, respectivamente. Um extrato bruto da mucosa gástrica foi obtido e semeado em coluna de DEAE-Sepharose para obtenção de enzimas do tipo pepsina. O extrato bruto dos cecos pilóricos foi submetido à cromatografia em coluna Benzamidina-Sepharose para obtenção da enzima do tipo tripsina. Para avaliar a capacidade catalítica da pepsina pomfret, ela foi incubada a 37°C com Ig G purificada (1:1 enzima/substrato, v/v, pH 2,0), e alíquotas foram extraídas em diferentes tempos (0, 8, 24 e 48 h), interrompendo a digestão com 20uL de tampão Tris 1M pH 9,0 e analisando-o por SDS-PAGE. A atividade hidrolítica da tripsina de palometa avaliada a 37° cobrindo a monocamada da linha celular C6 (ATCC CCL-107™) com uma solução de tripsina-EDTA a 0,25% pH 7,0. O descolamento celular foi monitorado por observação em microscópio invertido e registros fotográficos foram feitos. Os resultados obtidos demonstraram que a pepsina isolada foi capaz de hidrolisar seletivamente a IgG, liberando fragmentos F(ab´)2 de 100 kDa detectados por SDS-PAGE após 8h de incubação, e que a tripsina de palometa leva à tripsinização. Assim, ambas ases enzimas de origem pesqueira têm potencial de aplicação em processos tecnológicos.
Fil: Medina, Daiana Mailen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina
Fil: Leiva, Laura Cristina Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina
Fil: Pellegrini, Luciana. Universidad Nacional de Rosario; Argentina
Fil: Bustillo, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina
Fil: Acevedo Gomez, Antonella Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina
10º Congresso Brasileiro de Aquicultura e Biologia Aquática
Florianópolis
Brasil
Universidad Federal de Santa Catarina. Centro de Ciencias Agrarias
Sociedade Brasileira de Aquicultura e Biologia Aquática
Materia
Subprodutos
Enzimas Digestivas
Pygocentrus nattereri
Potenciais Aplicações Tecnológicas
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Acevedo Gomez, Antonella Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina10º Congresso Brasileiro de Aquicultura e Biologia AquáticaFlorianópolisBrasilUniversidad Federal de Santa Catarina. 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Fil: Pellegrini, Luciana. Universidad Nacional de Rosario; Argentina
Fil: Bustillo, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina
Fil: Acevedo Gomez, Antonella Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina
10º Congresso Brasileiro de Aquicultura e Biologia Aquática
Florianópolis
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Universidad Federal de Santa Catarina. Centro de Ciencias Agrarias
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