Tipificación molecular de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis en lecherías de Antioquia, Colombia

Autores
Correa Valencia, Nathalia; Moyano, Roberto Damian; Romano, Maria Isabel; Fernández Silva, Jorge Arturo
Año de publicación
2020
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Objetivo. Determinar la diversidad molecular de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) en muestras ambientales de hatos lecheros colombianos. Materiales y métodos. Las muestras ambientales de 25 hatos lecheros positivos a MAP por IS900-qPCR se cultivaron por duplicado en medio de yema de huevo de Herrold con micobactina J para obtener aislamientos. Las colonias sospechosas fueron confirmadas para MAP por IS900-qPCR. El ADN positivo se subtipó utilizando técnicas de unidades micobacterialess repetitivas intercaladas - número variable de repeticiones en tándem (MIRU-VNTR) y técnicas de repeticiones de multilocus de secuencia corta (MLSSR) para analizar las diferencias genéticas entre los aislamientos. Resultados. El subtipado reveló dos genotipos diferentes por MIRU-VNTR (INMV 2 e INMV 36). La técnica de MLSSR se realizó para aumentar el poder discriminatorio de lo obtenido por MIRU-VNTR, pero no se observaron diferencias entre los aislamientos recuperados. Conclusiones. El presente estudio representa un enfoque importante para el conocimiento del estatus epidemiológico de MAP en la población de estudio.
Objective. To determine Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) molecular diversity in environmental samples from Colombian dairy herds. Materials and methods. Environmental samples from 25 IS900-qPCR MAP-positive dairy herds were cultured by duplicate in Herrold´s egg yolk medium with mycobactin J to obtain isolates. Suspicious colonies were confirmed by MAPIS900-qPCR. Positive DNA was sub-typed using mycobacterial interspersed repetitive units-variable number of tandem repeat (MIRU-VNTR) and multilocus short sequence repeats (MLSSR) techniques to analyze the genetic differences between the isolates. Results. Sub-typing revealed two different genotypes by MIRU-VNTR (INMV 2 and INMV 36). MLSSR technique was carried out to increase the discriminatory power from what was obtained by MIRU-VNTR, but no differences were observed among the recovered isolates. Conclusions. The present study represents an important approach to the knowledge on MAP epidemiological status in the study population.
Fil: Correa Valencia, Nathalia. Universidad de Antioquia; Colombia
Fil: Moyano, Roberto Damian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina
Fil: Romano, Maria Isabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina
Fil: Fernández Silva, Jorge Arturo. Universidad de Antioquia; Colombia
Materia
Tipificación Molecular
Paratuberculosis
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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Objective. To determine Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) molecular diversity in environmental samples from Colombian dairy herds. Materials and methods. Environmental samples from 25 IS900-qPCR MAP-positive dairy herds were cultured by duplicate in Herrold´s egg yolk medium with mycobactin J to obtain isolates. Suspicious colonies were confirmed by MAPIS900-qPCR. Positive DNA was sub-typed using mycobacterial interspersed repetitive units-variable number of tandem repeat (MIRU-VNTR) and multilocus short sequence repeats (MLSSR) techniques to analyze the genetic differences between the isolates. Results. Sub-typing revealed two different genotypes by MIRU-VNTR (INMV 2 and INMV 36). MLSSR technique was carried out to increase the discriminatory power from what was obtained by MIRU-VNTR, but no differences were observed among the recovered isolates. Conclusions. The present study represents an important approach to the knowledge on MAP epidemiological status in the study population.
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