Identification of cross-reactive B-cell epitopes between Bos d 9.0101(Bos Taurus) and Gly m 5.0101 (Glycine max) by epitope mapping MALDI-TOF MS

Autores
Candreva, Ángela María; Ferrer Navarro, Mario; Bronsoms, Silvia; Quiroga, Alejandra Viviana; Curciarello, Renata; Cauerhff, Ana; Petruccelli, Silvana; Docena, Guillermo H.; Trejo, Sebastian Alejandro
Año de publicación
2017
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Exposure to cow's milk constitutes one of the most common causes of food allergy. In addition, exposure to soy proteins has become relevant in a restricted proportion of milk allergic pediatric patients treated with soy formulae as a dairy substitute, because of the cross-allergenicity described between soy and milk proteins. We have previously identified several cross-reactive allergens between milk and soy that may explain this intolerance. The purpose of the present work was to identify epitopes in the purified αS1-casein and the recombinant soy allergen Gly m 5.0101 (Gly m 5) using an α-casein-specific monoclonal antibody (1D5 mAb) through two different approaches for epitope mapping, to understand cross-reactivity between milk and soy. The 1D5 mAb was immobilized onto magnetic beads, incubated with the peptide mixture previously obtained by enzymatic digestion of the allergens, and the captured peptides were identified by MALDI-TOF MS analysis. On a second approach, the peptide mixture was resolved by RP-HPLC and immunodominant peptides were identified by dot blot with the mAb. Finally, recognized peptides were sequenced by MALDI-TOF MS. This novel MS based approach led us to identify and characterize four peptides on α-casein and three peptides on Gly m 5 with a common core motif. Information obtained from these cross-reactive epitopes allows us to gain valuable insight into the molecular mechanisms of cross-reactivity, to further develop new and more effective vaccines for food allergy.
Fil: Candreva, Ángela María. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina
Fil: Ferrer Navarro, Mario. Universitat Autònoma de Barcelona; España
Fil: Bronsoms, Silvia. Universitat Autònoma de Barcelona; España
Fil: Quiroga, Alejandra Viviana. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina
Fil: Curciarello, Renata. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina
Fil: Cauerhff, Ana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Petruccelli, Silvana. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina
Fil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina
Fil: Trejo, Sebastian Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular; Argentina. Universitat Autònoma de Barcelona; España
Materia
Bos D 9.0101
Cow'S Milk
Cross-Reactivity
Epitope Mapping
Gly M 5.0101
Maldi-Tof Ms
Soybean
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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The purpose of the present work was to identify epitopes in the purified αS1-casein and the recombinant soy allergen Gly m 5.0101 (Gly m 5) using an α-casein-specific monoclonal antibody (1D5 mAb) through two different approaches for epitope mapping, to understand cross-reactivity between milk and soy. The 1D5 mAb was immobilized onto magnetic beads, incubated with the peptide mixture previously obtained by enzymatic digestion of the allergens, and the captured peptides were identified by MALDI-TOF MS analysis. On a second approach, the peptide mixture was resolved by RP-HPLC and immunodominant peptides were identified by dot blot with the mAb. Finally, recognized peptides were sequenced by MALDI-TOF MS. This novel MS based approach led us to identify and characterize four peptides on α-casein and three peptides on Gly m 5 with a common core motif. Information obtained from these cross-reactive epitopes allows us to gain valuable insight into the molecular mechanisms of cross-reactivity, to further develop new and more effective vaccines for food allergy.Fil: Candreva, Ángela María. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Ferrer Navarro, Mario. Universitat Autònoma de Barcelona; EspañaFil: Bronsoms, Silvia. Universitat Autònoma de Barcelona; EspañaFil: Quiroga, Alejandra Viviana. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Curciarello, Renata. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Cauerhff, Ana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Petruccelli, Silvana. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; ArgentinaFil: Trejo, Sebastian Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular; Argentina. 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Fil: Candreva, Ángela María. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina
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Fil: Cauerhff, Ana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Petruccelli, Silvana. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina
Fil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina
Fil: Trejo, Sebastian Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular; Argentina. Universitat Autònoma de Barcelona; España
description Exposure to cow's milk constitutes one of the most common causes of food allergy. In addition, exposure to soy proteins has become relevant in a restricted proportion of milk allergic pediatric patients treated with soy formulae as a dairy substitute, because of the cross-allergenicity described between soy and milk proteins. We have previously identified several cross-reactive allergens between milk and soy that may explain this intolerance. The purpose of the present work was to identify epitopes in the purified αS1-casein and the recombinant soy allergen Gly m 5.0101 (Gly m 5) using an α-casein-specific monoclonal antibody (1D5 mAb) through two different approaches for epitope mapping, to understand cross-reactivity between milk and soy. The 1D5 mAb was immobilized onto magnetic beads, incubated with the peptide mixture previously obtained by enzymatic digestion of the allergens, and the captured peptides were identified by MALDI-TOF MS analysis. On a second approach, the peptide mixture was resolved by RP-HPLC and immunodominant peptides were identified by dot blot with the mAb. Finally, recognized peptides were sequenced by MALDI-TOF MS. This novel MS based approach led us to identify and characterize four peptides on α-casein and three peptides on Gly m 5 with a common core motif. Information obtained from these cross-reactive epitopes allows us to gain valuable insight into the molecular mechanisms of cross-reactivity, to further develop new and more effective vaccines for food allergy.
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