Insulina induce cambios a nivel transcripcional y post-traduccional en la expresión de receptores GABAA en células Jurkat

Autores
Dionisio, Leonardo Raul; Chrestia, Juan Facundo; Bouzat, Cecilia Beatriz; Esandi, María del Carmen
Año de publicación
2013
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Hemos demostrado la presencia de receptores de GABAA en la línea celular de linfocitos T, Jurkat. Al igual que lo descripto en neuronas, observamos variación en la expresión de subunidades frente a diferentes estímulos, tales como GABA y progesterona. Dado que en neuronas insulina induce cambios en la expresión de receptores GABAA, evaluamos si este fenómeno también ocurre en linfocitos. Para ello, células Jurkat fueron expuestas a insulina 0,5 µM durante 15 y 40 h y evaluamos mediante RT-qPCR cambios en la expresión del ARNm de subunidades del receptor. Luego de 15 h de incubación con insulina, se detectó aumento de la subunidad β3 y disminución de la subunidad α1. Por otro lado, se evaluó si insulina induce cambios rápidos en la expresión de receptores en membrana. Se expuso a células Jurkat durante 10 minutos a insulina y luego se realizó una tinción por immunofluorescencia de los receptores de superficie utilizando un anticuerpo contra la subunidad β3. Se observó un incremento en membrana de la marca específica para dicha subunidad luego de la incubación con la hormona. Durante este tiempo, los niveles de ARNm de dicha subunidad no fueron alterados, sugiriendo que insulina induce en células Jurkat, al igual que en neuronas, una rápida translocación a membrana de los receptores GABAA sin afectar la transcripción de genes. Nuestros resultados demuestran dos efectos temporalmente separados de insulina en la expresión de receptores de GABAA en células Jurkat: uno lento, que consiste en la modificación de la expresión de subunidades a nivel de ARNm; otro rápido, post-traduccional, en el que la subunidad β3 sería fosforilada aumentando la translocación de receptores a membrana.
Fil: Dionisio, Leonardo Raul. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Chrestia, Juan Facundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Bouzat, Cecilia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
Fil: Esandi, María del Carmen. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
LVIII Reunión Anual de Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Anual Sociedad Argentina de Fisiología y XLV Reunión Anual Sociedad Argentina de Farmacología Experimental
Mar del Plata
Argentina
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Asociación Argentina de Farmacología Experimental
Sociedad Argentina de Fisiología
Materia
INSULINA
RECEPTOR GABAA
CELULAS JURKAT
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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Por otro lado, se evaluó si insulina induce cambios rápidos en la expresión de receptores en membrana. Se expuso a células Jurkat durante 10 minutos a insulina y luego se realizó una tinción por immunofluorescencia de los receptores de superficie utilizando un anticuerpo contra la subunidad β3. Se observó un incremento en membrana de la marca específica para dicha subunidad luego de la incubación con la hormona. Durante este tiempo, los niveles de ARNm de dicha subunidad no fueron alterados, sugiriendo que insulina induce en células Jurkat, al igual que en neuronas, una rápida translocación a membrana de los receptores GABAA sin afectar la transcripción de genes. Nuestros resultados demuestran dos efectos temporalmente separados de insulina en la expresión de receptores de GABAA en células Jurkat: uno lento, que consiste en la modificación de la expresión de subunidades a nivel de ARNm; otro rápido, post-traduccional, en el que la subunidad β3 sería fosforilada aumentando la translocación de receptores a membrana.Fil: Dionisio, Leonardo Raul. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Chrestia, Juan Facundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Bouzat, Cecilia Beatriz. 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Fil: Dionisio, Leonardo Raul. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
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Fil: Esandi, María del Carmen. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina
LVIII Reunión Anual de Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Anual Sociedad Argentina de Fisiología y XLV Reunión Anual Sociedad Argentina de Farmacología Experimental
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