A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement

Autores
Luzzani, Carlos Daniel; Neiman, Gabriel; Garate, Ximena; Questa, María; Solari, Claudia María; Fernandez Espinosa, Darío; García, Marcela Nilda; Errecalde, Ana Lía; Guberman, Alejandra Sonia; Scassa, María Elida; Sevlever, Gustavo; Romorini, Leonardo; Miriuka, Santiago Gabriel
Año de publicación
2015
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs) are a promising source of cells for regenerative therapies. Although they can be isolated easily from several tissues, cell expansion is limited since their properties are lost with successive passages. Hence, pluripotent derived MSCs (PD-MSCs) arise as a suitable alternative for MSC production. Nevertheless, at present, PD-MSC derivation protocols are either expensive or not suitable for clinical purposes. Methods: In this work we present a therapy-grade, inexpensive and simple protocol to derive MSCs from pluripotent stem cells (PSCs) based on the use of platelet lysate (PL) as medium supplement. Results: We showed that the PD-MSCPL expressed multiple MSC markers, including CD90, CD73, CD105, CD166, and CD271, among others. These cells also show multilineage differentiation ability and immunomodulatory effects on pre-stimulated lymphocytes. Thorough characterization of these cells showed that a PD-MSCPL resembles an umbilical cord (UC) MSC and differs from a PSC in surface marker and extracellular matrix proteins and integrin expression. Moreover, the OCT-4 promoter is re-methylated with mesenchymal differentiation comparable with the methylation levels of UC-MSCs and fibroblasts. Lastly, the use of PL-supplemented medium generates significantly more MSCs than the use of fetal bovine serum. Conclusions: This protocol can be used to generate a large amount of PD-MSCs with low cost and is compatible with clinical therapies.
Fil: Luzzani, Carlos Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Neiman, Gabriel. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Garate, Ximena. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Questa, María. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Solari, Claudia María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Fil: Fernandez Espinosa, Darío. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: García, Marcela Nilda. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Ciencias Morfológicas; Argentina
Fil: Errecalde, Ana Lía. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Ciencias Morfológicas; Argentina
Fil: Guberman, Alejandra Sonia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Fil: Scassa, María Elida. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Sevlever, Gustavo. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Romorini, Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Miriuka, Santiago Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina
Materia
Mesenchymal Stem Cells
Pluripotent Stem Cells
Platelet Lysate
Peripheral Blood Mononuclear Cell
Multilineage Differenciation
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
OAI Identificador
oai:ri.conicet.gov.ar:11336/125968
Acceder
id CONICETDig_491fe88a72821d93a4346748ea31d6ef
oai_identifier_str oai:ri.conicet.gov.ar:11336/125968
network_acronym_str CONICETDig
repository_id_str 3498
network_name_str CONICET Digital (CONICET)
spelling A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplementLuzzani, Carlos DanielNeiman, GabrielGarate, XimenaQuesta, MaríaSolari, Claudia MaríaFernandez Espinosa, DaríoGarcía, Marcela NildaErrecalde, Ana LíaGuberman, Alejandra SoniaScassa, María ElidaSevlever, GustavoRomorini, LeonardoMiriuka, Santiago GabrielMesenchymal Stem CellsPluripotent Stem CellsPlatelet LysatePeripheral Blood Mononuclear CellMultilineage Differenciationhttps://purl.org/becyt/ford/3.4https://purl.org/becyt/ford/3Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs) are a promising source of cells for regenerative therapies. Although they can be isolated easily from several tissues, cell expansion is limited since their properties are lost with successive passages. Hence, pluripotent derived MSCs (PD-MSCs) arise as a suitable alternative for MSC production. Nevertheless, at present, PD-MSC derivation protocols are either expensive or not suitable for clinical purposes. Methods: In this work we present a therapy-grade, inexpensive and simple protocol to derive MSCs from pluripotent stem cells (PSCs) based on the use of platelet lysate (PL) as medium supplement. Results: We showed that the PD-MSCPL expressed multiple MSC markers, including CD90, CD73, CD105, CD166, and CD271, among others. These cells also show multilineage differentiation ability and immunomodulatory effects on pre-stimulated lymphocytes. Thorough characterization of these cells showed that a PD-MSCPL resembles an umbilical cord (UC) MSC and differs from a PSC in surface marker and extracellular matrix proteins and integrin expression. Moreover, the OCT-4 promoter is re-methylated with mesenchymal differentiation comparable with the methylation levels of UC-MSCs and fibroblasts. Lastly, the use of PL-supplemented medium generates significantly more MSCs than the use of fetal bovine serum. Conclusions: This protocol can be used to generate a large amount of PD-MSCs with low cost and is compatible with clinical therapies.Fil: Luzzani, Carlos Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; ArgentinaFil: Neiman, Gabriel. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Garate, Ximena. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Questa, María. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Solari, Claudia María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Fernandez Espinosa, Darío. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; ArgentinaFil: García, Marcela Nilda. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Ciencias Morfológicas; ArgentinaFil: Errecalde, Ana Lía. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Ciencias Morfológicas; ArgentinaFil: Guberman, Alejandra Sonia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Scassa, María Elida. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; ArgentinaFil: Sevlever, Gustavo. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; ArgentinaFil: Romorini, Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; ArgentinaFil: Miriuka, Santiago Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaBioMed Central Ltd.2015-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_6501info:ar-repo/semantics/articuloapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/125968Luzzani, Carlos Daniel; Neiman, Gabriel; Garate, Ximena; Questa, María; Solari, Claudia María; et al.; A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement; BioMed Central Ltd.; Stem Cell Research and Therapy; 6; 1; 1-2015; 1-131757-6512CONICET DigitalCONICETenginfo:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://stemcellres.biomedcentral.com/articles/10.1186/scrt540info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://link.springer.com/article/10.1186/scrt540info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/10.1186/scrt540info:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/reponame:CONICET Digital (CONICET)instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas2025-09-03T09:59:44Zoai:ri.conicet.gov.ar:11336/125968instacron:CONICETInstitucionalhttp://ri.conicet.gov.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://ri.conicet.gov.ar/oai/requestdasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:34982025-09-03 09:59:44.406CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicasfalse
dc.title.none.fl_str_mv A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
title A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
spellingShingle A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
Luzzani, Carlos Daniel
Mesenchymal Stem Cells
Pluripotent Stem Cells
Platelet Lysate
Peripheral Blood Mononuclear Cell
Multilineage Differenciation
title_short A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
title_full A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
title_fullStr A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
title_full_unstemmed A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
title_sort A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement
dc.creator.none.fl_str_mv Luzzani, Carlos Daniel
Neiman, Gabriel
Garate, Ximena
Questa, María
Solari, Claudia María
Fernandez Espinosa, Darío
García, Marcela Nilda
Errecalde, Ana Lía
Guberman, Alejandra Sonia
Scassa, María Elida
Sevlever, Gustavo
Romorini, Leonardo
Miriuka, Santiago Gabriel
author Luzzani, Carlos Daniel
author_facet Luzzani, Carlos Daniel
Neiman, Gabriel
Garate, Ximena
Questa, María
Solari, Claudia María
Fernandez Espinosa, Darío
García, Marcela Nilda
Errecalde, Ana Lía
Guberman, Alejandra Sonia
Scassa, María Elida
Sevlever, Gustavo
Romorini, Leonardo
Miriuka, Santiago Gabriel
author_role author
author2 Neiman, Gabriel
Garate, Ximena
Questa, María
Solari, Claudia María
Fernandez Espinosa, Darío
García, Marcela Nilda
Errecalde, Ana Lía
Guberman, Alejandra Sonia
Scassa, María Elida
Sevlever, Gustavo
Romorini, Leonardo
Miriuka, Santiago Gabriel
author2_role author
author
author
author
author
author
author
author
author
author
author
author
dc.subject.none.fl_str_mv Mesenchymal Stem Cells
Pluripotent Stem Cells
Platelet Lysate
Peripheral Blood Mononuclear Cell
Multilineage Differenciation
topic Mesenchymal Stem Cells
Pluripotent Stem Cells
Platelet Lysate
Peripheral Blood Mononuclear Cell
Multilineage Differenciation
purl_subject.fl_str_mv https://purl.org/becyt/ford/3.4
https://purl.org/becyt/ford/3
dc.description.none.fl_txt_mv Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs) are a promising source of cells for regenerative therapies. Although they can be isolated easily from several tissues, cell expansion is limited since their properties are lost with successive passages. Hence, pluripotent derived MSCs (PD-MSCs) arise as a suitable alternative for MSC production. Nevertheless, at present, PD-MSC derivation protocols are either expensive or not suitable for clinical purposes. Methods: In this work we present a therapy-grade, inexpensive and simple protocol to derive MSCs from pluripotent stem cells (PSCs) based on the use of platelet lysate (PL) as medium supplement. Results: We showed that the PD-MSCPL expressed multiple MSC markers, including CD90, CD73, CD105, CD166, and CD271, among others. These cells also show multilineage differentiation ability and immunomodulatory effects on pre-stimulated lymphocytes. Thorough characterization of these cells showed that a PD-MSCPL resembles an umbilical cord (UC) MSC and differs from a PSC in surface marker and extracellular matrix proteins and integrin expression. Moreover, the OCT-4 promoter is re-methylated with mesenchymal differentiation comparable with the methylation levels of UC-MSCs and fibroblasts. Lastly, the use of PL-supplemented medium generates significantly more MSCs than the use of fetal bovine serum. Conclusions: This protocol can be used to generate a large amount of PD-MSCs with low cost and is compatible with clinical therapies.
Fil: Luzzani, Carlos Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Neiman, Gabriel. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Garate, Ximena. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Questa, María. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Solari, Claudia María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Fil: Fernandez Espinosa, Darío. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: García, Marcela Nilda. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Ciencias Morfológicas; Argentina
Fil: Errecalde, Ana Lía. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Ciencias Morfológicas; Argentina
Fil: Guberman, Alejandra Sonia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Fil: Scassa, María Elida. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Sevlever, Gustavo. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Romorini, Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina
Fil: Miriuka, Santiago Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia. Laboratorio de Biología del Desarrollo Celular; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina
description Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs) are a promising source of cells for regenerative therapies. Although they can be isolated easily from several tissues, cell expansion is limited since their properties are lost with successive passages. Hence, pluripotent derived MSCs (PD-MSCs) arise as a suitable alternative for MSC production. Nevertheless, at present, PD-MSC derivation protocols are either expensive or not suitable for clinical purposes. Methods: In this work we present a therapy-grade, inexpensive and simple protocol to derive MSCs from pluripotent stem cells (PSCs) based on the use of platelet lysate (PL) as medium supplement. Results: We showed that the PD-MSCPL expressed multiple MSC markers, including CD90, CD73, CD105, CD166, and CD271, among others. These cells also show multilineage differentiation ability and immunomodulatory effects on pre-stimulated lymphocytes. Thorough characterization of these cells showed that a PD-MSCPL resembles an umbilical cord (UC) MSC and differs from a PSC in surface marker and extracellular matrix proteins and integrin expression. Moreover, the OCT-4 promoter is re-methylated with mesenchymal differentiation comparable with the methylation levels of UC-MSCs and fibroblasts. Lastly, the use of PL-supplemented medium generates significantly more MSCs than the use of fetal bovine serum. Conclusions: This protocol can be used to generate a large amount of PD-MSCs with low cost and is compatible with clinical therapies.
publishDate 2015
dc.date.none.fl_str_mv 2015-01
dc.type.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
http://purl.org/coar/resource_type/c_6501
info:ar-repo/semantics/articulo
format article
status_str publishedVersion
dc.identifier.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/11336/125968
Luzzani, Carlos Daniel; Neiman, Gabriel; Garate, Ximena; Questa, María; Solari, Claudia María; et al.; A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement; BioMed Central Ltd.; Stem Cell Research and Therapy; 6; 1; 1-2015; 1-13
1757-6512
CONICET Digital
CONICET
url http://hdl.handle.net/11336/125968
identifier_str_mv Luzzani, Carlos Daniel; Neiman, Gabriel; Garate, Ximena; Questa, María; Solari, Claudia María; et al.; A therapy-grade protocol for differentiation of pluripotent stem cells into mesenchymal stem cells using platelet lysate as supplement; BioMed Central Ltd.; Stem Cell Research and Therapy; 6; 1; 1-2015; 1-13
1757-6512
CONICET Digital
CONICET
dc.language.none.fl_str_mv eng
language eng
dc.relation.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://stemcellres.biomedcentral.com/articles/10.1186/scrt540
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://link.springer.com/article/10.1186/scrt540
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/10.1186/scrt540
dc.rights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
eu_rights_str_mv openAccess
rights_invalid_str_mv https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
application/pdf
application/pdf
application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv BioMed Central Ltd.
publisher.none.fl_str_mv BioMed Central Ltd.
dc.source.none.fl_str_mv reponame:CONICET Digital (CONICET)
instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
reponame_str CONICET Digital (CONICET)
collection CONICET Digital (CONICET)
instname_str Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
repository.name.fl_str_mv CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
repository.mail.fl_str_mv dasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.ar
_version_ 1842269598591746048
score 13.13397

Publicaciones similares