Reactions of peroxynitrite in the mitochondrial matrix

Autores
Valdez, Laura Batriz; Alvarez, Silvia; Lores Arnaiz, Silvia; Schöpfer, Francisco; Carreras, Maria Cecilia; Poderoso, Juan José; Boveris, Alberto Antonio
Año de publicación
2000
Idioma
inglés
Tipo de recurso
artículo
Estado
versión publicada
Descripción
Superoxide radical (O2 -) and nitric oxide (NO) produced at the mitochondrial inner membrane react to form peroxynitrite (ONOO-) in the mitochondrial matrix. Intramitochondrial ONOO- effectively reacts with a few biomolecules according to reaction constants and intramitochondrial concentrations. The second-order reaction constants (in M-1 s-1) of ONOO- with NADH (233 ± 27), ubiquinol-0 (485 ± 54) and GSH (183 ± 12) were determined fluorometrically by a simple competition assay of product formation. The oxidation of the components of the mitochondrial matrix by ONOO- was also followed in the presence of CO2, to assess the reactivity of the nitrosoperoxocarboxylate adduct (ONOOCO2 -) towards the same reductants. The ratio of product formation was about similar both in the presence of 2.5 mM CO2 and in air-equilibrated conditions. Liver submitochondrial particles supplemented with 0.25-2 μM ONOO- showed a O2 - production that indicated ubisemiquinone formation and autooxidation. The nitration of mitochondrial proteins produced after addition of 200 μM ONOO- was observed by Western blot analysis. Protein nitration was prevented by the addition of 50-200 μM ubiquinol-0 or GSH. An intramitochondrial steady state concentration of about 2 nM ONOO- was calculated, taking into account the rate constants and concentrations of ONOO- coreactants. (C) 2000 Elsevier Science Inc.
Fil: Valdez, Laura Batriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina
Fil: Alvarez, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; Argentina
Fil: Lores Arnaiz, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; Argentina
Fil: Schöpfer, Francisco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín. Laboratorio de Metabolismo del Oxígeno; Argentina
Fil: Carreras, Maria Cecilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín. Laboratorio de Metabolismo del Oxígeno; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Poderoso, Juan José. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín. Laboratorio de Metabolismo del Oxígeno; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina
Fil: Boveris, Alberto Antonio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; Argentina
Materia
Free Radicals
Gsh Oxidation
Mitochondria
Mitochondrial Protein Nitration
Nadh-Oxidation
Peroxynitrite
Superoxide Production
Ubiquinol Oxidation
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repositorio
CONICET Digital (CONICET)
Institución
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
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The oxidation of the components of the mitochondrial matrix by ONOO- was also followed in the presence of CO2, to assess the reactivity of the nitrosoperoxocarboxylate adduct (ONOOCO2 -) towards the same reductants. The ratio of product formation was about similar both in the presence of 2.5 mM CO2 and in air-equilibrated conditions. Liver submitochondrial particles supplemented with 0.25-2 μM ONOO- showed a O2 - production that indicated ubisemiquinone formation and autooxidation. The nitration of mitochondrial proteins produced after addition of 200 μM ONOO- was observed by Western blot analysis. Protein nitration was prevented by the addition of 50-200 μM ubiquinol-0 or GSH. An intramitochondrial steady state concentration of about 2 nM ONOO- was calculated, taking into account the rate constants and concentrations of ONOO- coreactants. (C) 2000 Elsevier Science Inc.Fil: Valdez, Laura Batriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; ArgentinaFil: Alvarez, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; ArgentinaFil: Lores Arnaiz, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Analítica y Fisicoquímica; ArgentinaFil: Schöpfer, Francisco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín. Laboratorio de Metabolismo del Oxígeno; ArgentinaFil: Carreras, Maria Cecilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín. Laboratorio de Metabolismo del Oxígeno; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Poderoso, Juan José. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín. Laboratorio de Metabolismo del Oxígeno; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Boveris, Alberto Antonio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. 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