Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae
- Autores
- Banchiero, Micaela Julieta; Nieto Farías, María Victoria; Tiraboschi, Georgina; de Lillo, Maria Florencia; Bohl, Luciana Paola; Cadona, Jimena Soledad; Sanso, Andrea Mariel
- Año de publicación
- 2024
- Idioma
- español castellano
- Tipo de recurso
- documento de conferencia
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- Streptococcus agalactiae es uno de los patógenos más frecuentemente asociado con mastitis bovina. Esta bacteria puede colonizar el epitelio mamario y producir factores de virulencia que afectan la función fisiológica de las células epiteliales, implicados en la invasión, la adhesión y la respuesta inmunitaria. Considerando que en la patogenia de la infección por S. agalactiae existen dos pasos críticos, que son la adhesión y la invasión de las células huésped, y dado que no hay estudios que caracterizan estos procesos, el objetivo fue poner a punto las técnicas para estudiar la interacción S. agalactiae-célula epitelial mamaria para luego, proponer terapias para impedir o mitigar la infección por S. agalactiae.Se analizaron dos cepas de S. agalactiae aisladas de vacas lecheras con mastitis de la Cuenca Mar y Sierras (B49 y B63). Se utilizó la línea celular bovina de células alveolares mamarias (MAC-T). En el caso de los ensayos de adherencia, en una placa de 96 pocillos se co-cultivó durante 2 h una suspensión bacteriana con una monocapa confluente de células MAC-T en DMEM a una multiplicidad de infección (MOI) de 10:1 Posteriormente, se descartó el medio de cultivo de la placa y se realizaron lavados con PBS. Se lisaron las células con Triton X-100 (0,025% v/v) para liberar bacterias intracelulares. Se realizaron diluciones seriadas, se sembraron por triplicado en placas de TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para determinar las UFC por pocillo. En el caso de los ensayos de internalización, el co-cultivo se trató con gentamicina (100 μg/ml) en DMEM a 37°C2 durante 2 h para eliminar las bacterias extracelulares. Antes de descartar los sobrenadantes, alícuotas de 5 μL del mismo se sembraron en placas con TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para comprobar la efectividad del tratamiento con gentamicina. Las monocapas se lavaron con PBS y se lisaron con Triton X-100. Los lisados se diluyeron serialmente 10 veces, se sembraron por triplicado en TSA y se incubaron overnight a 37°C. Para el ensayo de sobrevida, el co-cultivo se trató con gentamicina 0,01 mg/mL.Los resultados obtenidos muestran que la cepa B63 se adhiere, pero no internaliza en las células MAC-T, mientras que la cepa B49 se adhiere e internaliza en las células epiteliales mamarias y, además, sobrevive en las mismas luego de 24 h de incubación.La puesta a punto del ensayo resultó exitosa y, mostró diversidad en cuanto a la capacidad de S. agalactiae de internalizar y sobrevivir en tejido mamario. Las cepas utilizadas para los ensayos fueron obtenidas de diferentes tambos y presentaban distintos serotipos, perfiles de virulencia y resistencia a antibióticos. A pesar de que las cepas ensayadas fueron sólo dos, los resultados muestran que distintas cepas de este patógeno pueden interaccionar de diferente manera con las células epiteliales del hospedador, lo que pone en evidencia la importancia de estudiar los factores de virulencia involucrados.
Fil: Banchiero, Micaela Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Nieto Farías, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Tiraboschi, Georgina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina
Fil: de Lillo, Maria Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina
Fil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina
Fil: Cadona, Jimena Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
Fil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina
XVI Congreso Argentino de Microbiología; V Simposio Argentino de Inocuidad Alimentaria
Ciudad Autónoma de Buenos Aires
Argentina
Asociación Argentina de Microbiología - Materia
-
Streptococcus agalactiae
Adherencia
Internalización
Mastitis bovina - Nivel de accesibilidad
- acceso abierto
- Condiciones de uso
- https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
- Repositorio
.jpg)
- Institución
- Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
- OAI Identificador
- oai:ri.conicet.gov.ar:11336/245523
Ver los metadatos del registro completo
| id |
CONICETDig_24123564d6b97a22b22e7ba5604a203e |
|---|---|
| oai_identifier_str |
oai:ri.conicet.gov.ar:11336/245523 |
| network_acronym_str |
CONICETDig |
| repository_id_str |
3498 |
| network_name_str |
CONICET Digital (CONICET) |
| spelling |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiaeBanchiero, Micaela JulietaNieto Farías, María VictoriaTiraboschi, Georginade Lillo, Maria FlorenciaBohl, Luciana PaolaCadona, Jimena SoledadSanso, Andrea MarielStreptococcus agalactiaeAdherenciaInternalizaciónMastitis bovinahttps://purl.org/becyt/ford/1.6https://purl.org/becyt/ford/1Streptococcus agalactiae es uno de los patógenos más frecuentemente asociado con mastitis bovina. Esta bacteria puede colonizar el epitelio mamario y producir factores de virulencia que afectan la función fisiológica de las células epiteliales, implicados en la invasión, la adhesión y la respuesta inmunitaria. Considerando que en la patogenia de la infección por S. agalactiae existen dos pasos críticos, que son la adhesión y la invasión de las células huésped, y dado que no hay estudios que caracterizan estos procesos, el objetivo fue poner a punto las técnicas para estudiar la interacción S. agalactiae-célula epitelial mamaria para luego, proponer terapias para impedir o mitigar la infección por S. agalactiae.Se analizaron dos cepas de S. agalactiae aisladas de vacas lecheras con mastitis de la Cuenca Mar y Sierras (B49 y B63). Se utilizó la línea celular bovina de células alveolares mamarias (MAC-T). En el caso de los ensayos de adherencia, en una placa de 96 pocillos se co-cultivó durante 2 h una suspensión bacteriana con una monocapa confluente de células MAC-T en DMEM a una multiplicidad de infección (MOI) de 10:1 Posteriormente, se descartó el medio de cultivo de la placa y se realizaron lavados con PBS. Se lisaron las células con Triton X-100 (0,025% v/v) para liberar bacterias intracelulares. Se realizaron diluciones seriadas, se sembraron por triplicado en placas de TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para determinar las UFC por pocillo. En el caso de los ensayos de internalización, el co-cultivo se trató con gentamicina (100 μg/ml) en DMEM a 37°C2 durante 2 h para eliminar las bacterias extracelulares. Antes de descartar los sobrenadantes, alícuotas de 5 μL del mismo se sembraron en placas con TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para comprobar la efectividad del tratamiento con gentamicina. Las monocapas se lavaron con PBS y se lisaron con Triton X-100. Los lisados se diluyeron serialmente 10 veces, se sembraron por triplicado en TSA y se incubaron overnight a 37°C. Para el ensayo de sobrevida, el co-cultivo se trató con gentamicina 0,01 mg/mL.Los resultados obtenidos muestran que la cepa B63 se adhiere, pero no internaliza en las células MAC-T, mientras que la cepa B49 se adhiere e internaliza en las células epiteliales mamarias y, además, sobrevive en las mismas luego de 24 h de incubación.La puesta a punto del ensayo resultó exitosa y, mostró diversidad en cuanto a la capacidad de S. agalactiae de internalizar y sobrevivir en tejido mamario. Las cepas utilizadas para los ensayos fueron obtenidas de diferentes tambos y presentaban distintos serotipos, perfiles de virulencia y resistencia a antibióticos. A pesar de que las cepas ensayadas fueron sólo dos, los resultados muestran que distintas cepas de este patógeno pueden interaccionar de diferente manera con las células epiteliales del hospedador, lo que pone en evidencia la importancia de estudiar los factores de virulencia involucrados.Fil: Banchiero, Micaela Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Nieto Farías, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Tiraboschi, Georgina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; ArgentinaFil: de Lillo, Maria Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; ArgentinaFil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; ArgentinaFil: Cadona, Jimena Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaXVI Congreso Argentino de Microbiología; V Simposio Argentino de Inocuidad AlimentariaCiudad Autónoma de Buenos AiresArgentinaAsociación Argentina de MicrobiologíaAsociación Argentina de Microbiología2024info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/conferenceObjectCongresoBookhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfapplication/vnd.openxmlformats-officedocument.wordprocessingml.documentapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/245523Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae; XVI Congreso Argentino de Microbiología; V Simposio Argentino de Inocuidad Alimentaria; Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Argentina; 2024; 544-544978-987-48458-2-5CONICET DigitalCONICETspainfo:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://cam2024.aam.org.ar/Nacionalinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/reponame:CONICET Digital (CONICET)instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas2025-09-03T10:01:13Zoai:ri.conicet.gov.ar:11336/245523instacron:CONICETInstitucionalhttp://ri.conicet.gov.ar/Organismo científico-tecnológicoNo correspondehttp://ri.conicet.gov.ar/oai/requestdasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.arArgentinaNo correspondeNo correspondeNo correspondeopendoar:34982025-09-03 10:01:13.795CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicasfalse |
| dc.title.none.fl_str_mv |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae |
| title |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae |
| spellingShingle |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae Banchiero, Micaela Julieta Streptococcus agalactiae Adherencia Internalización Mastitis bovina |
| title_short |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae |
| title_full |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae |
| title_fullStr |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae |
| title_full_unstemmed |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae |
| title_sort |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae |
| dc.creator.none.fl_str_mv |
Banchiero, Micaela Julieta Nieto Farías, María Victoria Tiraboschi, Georgina de Lillo, Maria Florencia Bohl, Luciana Paola Cadona, Jimena Soledad Sanso, Andrea Mariel |
| author |
Banchiero, Micaela Julieta |
| author_facet |
Banchiero, Micaela Julieta Nieto Farías, María Victoria Tiraboschi, Georgina de Lillo, Maria Florencia Bohl, Luciana Paola Cadona, Jimena Soledad Sanso, Andrea Mariel |
| author_role |
author |
| author2 |
Nieto Farías, María Victoria Tiraboschi, Georgina de Lillo, Maria Florencia Bohl, Luciana Paola Cadona, Jimena Soledad Sanso, Andrea Mariel |
| author2_role |
author author author author author author |
| dc.subject.none.fl_str_mv |
Streptococcus agalactiae Adherencia Internalización Mastitis bovina |
| topic |
Streptococcus agalactiae Adherencia Internalización Mastitis bovina |
| purl_subject.fl_str_mv |
https://purl.org/becyt/ford/1.6 https://purl.org/becyt/ford/1 |
| dc.description.none.fl_txt_mv |
Streptococcus agalactiae es uno de los patógenos más frecuentemente asociado con mastitis bovina. Esta bacteria puede colonizar el epitelio mamario y producir factores de virulencia que afectan la función fisiológica de las células epiteliales, implicados en la invasión, la adhesión y la respuesta inmunitaria. Considerando que en la patogenia de la infección por S. agalactiae existen dos pasos críticos, que son la adhesión y la invasión de las células huésped, y dado que no hay estudios que caracterizan estos procesos, el objetivo fue poner a punto las técnicas para estudiar la interacción S. agalactiae-célula epitelial mamaria para luego, proponer terapias para impedir o mitigar la infección por S. agalactiae.Se analizaron dos cepas de S. agalactiae aisladas de vacas lecheras con mastitis de la Cuenca Mar y Sierras (B49 y B63). Se utilizó la línea celular bovina de células alveolares mamarias (MAC-T). En el caso de los ensayos de adherencia, en una placa de 96 pocillos se co-cultivó durante 2 h una suspensión bacteriana con una monocapa confluente de células MAC-T en DMEM a una multiplicidad de infección (MOI) de 10:1 Posteriormente, se descartó el medio de cultivo de la placa y se realizaron lavados con PBS. Se lisaron las células con Triton X-100 (0,025% v/v) para liberar bacterias intracelulares. Se realizaron diluciones seriadas, se sembraron por triplicado en placas de TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para determinar las UFC por pocillo. En el caso de los ensayos de internalización, el co-cultivo se trató con gentamicina (100 μg/ml) en DMEM a 37°C2 durante 2 h para eliminar las bacterias extracelulares. Antes de descartar los sobrenadantes, alícuotas de 5 μL del mismo se sembraron en placas con TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para comprobar la efectividad del tratamiento con gentamicina. Las monocapas se lavaron con PBS y se lisaron con Triton X-100. Los lisados se diluyeron serialmente 10 veces, se sembraron por triplicado en TSA y se incubaron overnight a 37°C. Para el ensayo de sobrevida, el co-cultivo se trató con gentamicina 0,01 mg/mL.Los resultados obtenidos muestran que la cepa B63 se adhiere, pero no internaliza en las células MAC-T, mientras que la cepa B49 se adhiere e internaliza en las células epiteliales mamarias y, además, sobrevive en las mismas luego de 24 h de incubación.La puesta a punto del ensayo resultó exitosa y, mostró diversidad en cuanto a la capacidad de S. agalactiae de internalizar y sobrevivir en tejido mamario. Las cepas utilizadas para los ensayos fueron obtenidas de diferentes tambos y presentaban distintos serotipos, perfiles de virulencia y resistencia a antibióticos. A pesar de que las cepas ensayadas fueron sólo dos, los resultados muestran que distintas cepas de este patógeno pueden interaccionar de diferente manera con las células epiteliales del hospedador, lo que pone en evidencia la importancia de estudiar los factores de virulencia involucrados. Fil: Banchiero, Micaela Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Nieto Farías, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Tiraboschi, Georgina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina Fil: de Lillo, Maria Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina Fil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina Fil: Cadona, Jimena Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina XVI Congreso Argentino de Microbiología; V Simposio Argentino de Inocuidad Alimentaria Ciudad Autónoma de Buenos Aires Argentina Asociación Argentina de Microbiología |
| description |
Streptococcus agalactiae es uno de los patógenos más frecuentemente asociado con mastitis bovina. Esta bacteria puede colonizar el epitelio mamario y producir factores de virulencia que afectan la función fisiológica de las células epiteliales, implicados en la invasión, la adhesión y la respuesta inmunitaria. Considerando que en la patogenia de la infección por S. agalactiae existen dos pasos críticos, que son la adhesión y la invasión de las células huésped, y dado que no hay estudios que caracterizan estos procesos, el objetivo fue poner a punto las técnicas para estudiar la interacción S. agalactiae-célula epitelial mamaria para luego, proponer terapias para impedir o mitigar la infección por S. agalactiae.Se analizaron dos cepas de S. agalactiae aisladas de vacas lecheras con mastitis de la Cuenca Mar y Sierras (B49 y B63). Se utilizó la línea celular bovina de células alveolares mamarias (MAC-T). En el caso de los ensayos de adherencia, en una placa de 96 pocillos se co-cultivó durante 2 h una suspensión bacteriana con una monocapa confluente de células MAC-T en DMEM a una multiplicidad de infección (MOI) de 10:1 Posteriormente, se descartó el medio de cultivo de la placa y se realizaron lavados con PBS. Se lisaron las células con Triton X-100 (0,025% v/v) para liberar bacterias intracelulares. Se realizaron diluciones seriadas, se sembraron por triplicado en placas de TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para determinar las UFC por pocillo. En el caso de los ensayos de internalización, el co-cultivo se trató con gentamicina (100 μg/ml) en DMEM a 37°C2 durante 2 h para eliminar las bacterias extracelulares. Antes de descartar los sobrenadantes, alícuotas de 5 μL del mismo se sembraron en placas con TSA y se incubaron a 37 ºC durante 24 h para comprobar la efectividad del tratamiento con gentamicina. Las monocapas se lavaron con PBS y se lisaron con Triton X-100. Los lisados se diluyeron serialmente 10 veces, se sembraron por triplicado en TSA y se incubaron overnight a 37°C. Para el ensayo de sobrevida, el co-cultivo se trató con gentamicina 0,01 mg/mL.Los resultados obtenidos muestran que la cepa B63 se adhiere, pero no internaliza en las células MAC-T, mientras que la cepa B49 se adhiere e internaliza en las células epiteliales mamarias y, además, sobrevive en las mismas luego de 24 h de incubación.La puesta a punto del ensayo resultó exitosa y, mostró diversidad en cuanto a la capacidad de S. agalactiae de internalizar y sobrevivir en tejido mamario. Las cepas utilizadas para los ensayos fueron obtenidas de diferentes tambos y presentaban distintos serotipos, perfiles de virulencia y resistencia a antibióticos. A pesar de que las cepas ensayadas fueron sólo dos, los resultados muestran que distintas cepas de este patógeno pueden interaccionar de diferente manera con las células epiteliales del hospedador, lo que pone en evidencia la importancia de estudiar los factores de virulencia involucrados. |
| publishDate |
2024 |
| dc.date.none.fl_str_mv |
2024 |
| dc.type.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion info:eu-repo/semantics/conferenceObject Congreso Book http://purl.org/coar/resource_type/c_5794 info:ar-repo/semantics/documentoDeConferencia |
| status_str |
publishedVersion |
| format |
conferenceObject |
| dc.identifier.none.fl_str_mv |
http://hdl.handle.net/11336/245523 Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae; XVI Congreso Argentino de Microbiología; V Simposio Argentino de Inocuidad Alimentaria; Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Argentina; 2024; 544-544 978-987-48458-2-5 CONICET Digital CONICET |
| url |
http://hdl.handle.net/11336/245523 |
| identifier_str_mv |
Puesta a punto de ensayos de adherencia, internalización y sobrevida en aislamientos bovinos de Streptococcus agalactiae; XVI Congreso Argentino de Microbiología; V Simposio Argentino de Inocuidad Alimentaria; Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Argentina; 2024; 544-544 978-987-48458-2-5 CONICET Digital CONICET |
| dc.language.none.fl_str_mv |
spa |
| language |
spa |
| dc.relation.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://cam2024.aam.org.ar/ |
| dc.rights.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/ |
| eu_rights_str_mv |
openAccess |
| rights_invalid_str_mv |
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/ |
| dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf application/vnd.openxmlformats-officedocument.wordprocessingml.document application/pdf |
| dc.coverage.none.fl_str_mv |
Nacional |
| dc.publisher.none.fl_str_mv |
Asociación Argentina de Microbiología |
| publisher.none.fl_str_mv |
Asociación Argentina de Microbiología |
| dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:CONICET Digital (CONICET) instname:Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas |
| reponame_str |
CONICET Digital (CONICET) |
| collection |
CONICET Digital (CONICET) |
| instname_str |
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas |
| repository.name.fl_str_mv |
CONICET Digital (CONICET) - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas |
| repository.mail.fl_str_mv |
dasensio@conicet.gov.ar; lcarlino@conicet.gov.ar |
| _version_ |
1842269684196442112 |
| score |
13.13397 |