Determinación de ácido siálico sobre lipoproteínas de baja densidad aisladas por precipitación selectiva: propuesta de índices de composición

• Autores: Scoccia, Adriana Elena; Molinuevo, María Silvina; Cortizo, Ana María
• Año de publicación: 2003
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: artículo
• Materia: Bioquímica y Biología Molecular; Ácido siálico; Lipoproteínas de baja densidad; Aterogénesis; Sialic acid; Low density lipoprotein; Atherogenesis
• Institución: Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires

El objetivo de este estudio fue optimizar la determinación de ácido siálico en LDL aislada por precipitación selectiva y establecer relaciones entre componentes que puedan ser indicadores de aterogenicidad. Se empleó polivi- nilsulfato disuelto en polietiienglicol como reactivo precipitante, se ajustaron las condiciones de los lavados para garantizar la ausencia de otras proteínas del suero y se solubilizó la LDL en 5% de NaCI. Se determinó apoB, colesterol, proteínas y se optimizó la cuantificación de ácido siálico según el método de Warren modificado por Sobenin y col. Se realizó la evaluación del método analítico adaptado en cuanto a precisión intra- e ínter-ensayos (CV 8 y 9% respectivamente), linealidad (hasta 7 nmol de ácido siálico/tu- bo); efecto de los lavados; especificidad; ausencia de interferencia de blancos de reactivo precipitante; ensayo de recuperación (entre 88 y 120%). Los resultados obtenidos sobre 30 muestras de personas normolipémicas de ambos sexos (edades entre 30 y 65 años) expresados como media ± SEM fueron: colesterol 3,8 ± 0,2 mmol/l, ácido siálico 34,7 ± 2,7 pmol/l, ApoB 1,27 ± 0,09 pmol/l, proteínas 1,57 ± 0,08 g/l. índices de composición: ácido siálico/colesterol: 9,24 ± 0,48 mmol/mol, ácido siálico/apoB 34,4 ± 3 mol/mol y ácido siálico/proteína 39,6 ±1,31 pmol/g. Son necesarios estudios clínicos que permitan evaluar los alcances de los índices de composición propuestos como posibles indicadores de aterogenicidad.
The aim of this study was to optimize the sialic acid determination in LDL isolated by selective precipitation and to establish ratios between components as possible indicators of atherogenicity. Polyvinil sulfate in poly- etileneglycol was used as precipitation reactive, washed conditions were fixed to avoid contamination with serum proteins and the resulting LDL was dissolved in 5% NaCI. ApoB, cholesterol and protein were assessed. Sialic acid was optimized by the method of Warren modified by Sobenin et al. Analytical method was analyzed: intra and inter assay precision was 8 and 9% respectively; linearity up to 7 nmol of sialic acid/tube; the effect of washes; specificity; no interferences of the precipitating reactive; and the., recuperation was between 88-120%. The results obtained on 30 samples from normolipidemic subjects of both sexes (30-65 years old) expressed as means ± SEM were: cholesterol 3.8 ± 0.2 mmol/l, sialic acid 34.7 ±2.7 pmoi/l, ApoB 1.27 ± 0.09 pmoi/l, proteins 1.57 ± 0.08 g/l. Indexes of composition: sialic acid/cholesterol: 9.24 ± 0.48 mmol/mol, sialic acid/ApoB 34.4 ± 3 mol/mol and sialic acid/protein 39.6 ± 1.31 pmol/g. Additional clinical studies are needed in order to evaluate the possible application or the proposed index of atherogenicity.