Caracterización del papel de las inmunofilinas en la regulación de factores de transcripción

• Autores: Camisay, María Fernanda
• Año de publicación: 2019
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Erlejman, Alejandra G.
• Materia: FKBP51; FKBP52; AP-1; C-FOS; C-JUN; EGCG; NF-KAPPAB; PLACENTA; CELULAS TROFOBLASTICAS; FKBP51; FKBP52; AP-1; C-FOS; C-JUN; NF-KAPPAB; PLACENTA; EGCG; TROPHOBLASTIC CELLS
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Las inmunofilinas son una familia de proteínas que presentan un dominio con actividad peptidil-prolil-isomerasa (PPIasa); la mayoría de las cuales unen drogas inmunosupresoras. Dentro esta familia, se encuentran las FKBPs (FK506 Binding Proteins) que unen al macrólido FK506. Nuestro laboratorio demostró que FKBP-51 kDa (FKBP51) y FKBP-52 kDa (FKBP52) regulan antagónicamente la actividad transcripcional y localización subcelular de ciertos factores nucleares (NF-kappaB y receptores esteroides). El objetivo de esta tesis fue estudiar la regulación de las FKBPs sobre el complejo de factores de transcripción AP-1, particularmente sobre c-Fos y c-Jun, en células trofoblásticas (BeWo). Demostramos que FKBP52 favorece la activación sostenida de la quinasa ERK e incrementa la estabilidad proteica, la retención nuclear, la actividad transcripcional, la unión al ADN y los niveles de proteína de los miembros de AP-1. Por el contrario, la sobreexpresión de FKBP51 retrasa y disminuye la importación nuclear de c-Fos, como también inhibe la actividad transcripcional de AP-1. La contribución funcional del dominio PPIasa de ambas FKBPs resultó relevante en la modulación de AP-1. A nivel de los efectos biológicos de genes involucrados en placentación, y blancos de regulación de AP-1 y NF-kappaB, encontramos que FKBP52 aumenta los niveles de proteína de las metaloproteasas de la matriz (MMP-2 y MMP-9) e interleuquina 6 (IL-6). Asimismo, FKBP52 modula positivamente la actividad proteolítica de MMP-2. Mientras que FKBP51 reduce los niveles de proteína y la actividad gelatinasa de MMP-2. Finalmente, observamos que la Epigalocatequina Galato (EGCG, flavonoide presente en el té verde) actúa inhibiendo el efecto positivo de FKBP52 sobre la actividad de AP-1 y NF-kappaB . Los resultados de esta Tesis Doctoral demuestran que FKBP51 y FKBP52 regulan a los factores de transcripción de la familia AP-1. Esta regulación sería dependiente de la actividad PPIasa de estas FKBPs y ocurriría en forma antagónica . Más aún, postulamos que FKBP52 es un potencial blanco farmacológico de EGCG.
Inmunophilins are a family of proteins with a peptidyl-prolyl isomerase domain (PPIase), many of them bind inmunosuppresant drugs. Among the members of this family, FKBPs (FK506 Binding Proteins) bind the macrolide FK506. Our laboratory showed that both FKBP-51 kDa (FKBP51) and FKBP-52 kDa (FKBP52) regulate NF-kappaB and steroid receptors transcriptional activity and subcelullar localization in an antagonistic manner. The aim of this thesis was to study FKBPs regulation on AP-1, particularly c-Fos and c-Jun, in BeWo trophoblastic cells. We demostrated that FKBP52 favours a sustained ERK activation and increases the protein stability, the nuclear retention, the transcriptional activity, the DNA binding and protein levels of AP-1 members. In other matters, FKBP51 overexpression delays and reduces c-Fos nuclear entry as well as it inhibits AP-1 transcriptional activity. PPIase activity of both FKBPs consists on an important part of AP-1 modulation. In regards to the biological effects of AP-1 and NF-kappaB target genes which are also involved in placentation, we found that FKBP52 not only increases matrix metalloproteases (MMP-2 and MMP-9) and interleuquin 6 (IL-6) protein levels but also MMP-2 proteolytic activity. Whereas, FKBP51 decreases MMP-2 protein level and gelatin-degrading activity. Finally, we observed that Epigallocatechin Gallate (EGCG, green tea flavonoid) modulates negatively AP-1 and NF-kappaB transcriptional activity mediated by FKBP52. The results of this Doctoral Thesis encourage that FKBP51 and FKBP52 regulate AP-1, mainly in an opposite and PPIase dependent manner. We especulate that FKBP52 is a potential and pharmacology EGCG target.
Fil: Camisay, María Fernanda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.