Leucemia Linfática Crónica (LLC) : efecto de los nuevos inhibidores de quinasas sobre el clon leucémico y las células del microambiente tumoral

• Autores: Colado, Ana
• Año de publicación: 2020
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Borge, Mercedes; Gamberale, Romina
• Materia: LEUCEMIA LINFOCITICA CRONICA; BTK; MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS; ASPERGILLUS FUMIGATUS; MACROFAGOS; NEUTROFILOS; ANTICUERPOS ANTI-CD20; INHIBIDORES DEL BCR; CHRONIC LYMPHOCYTIC LEUKEMIA; BTK; MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS; ASPERGILLUS FUMIGATUS; MACROPHAGES; NEUTROPHILS; ANTI-CD20 ANTIBODIES; BCR INHIBITORS
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

La LLC es la leucemia de adultos más frecuente en Occidente. El uso de inhibidores de la tirosina quinasa de Bruton (iBTK) son nuevas y exitosas estrategias terapéuticas en LLC. Uno de los principales efectos adversos del tratamiento con ibrutinib, primer iBTK aprobado para su uso en pacientes, son las infecciones entre las que se encuentran aquellas causadas por micobacterias y hongos. Los efectos de los iBTK sobre las células de la inmunidad innata claves en el desarrollo de una respuesta anti-microbiana efectiva contra este tipo de microorganismos no han sido estudiados en profundidad. En este trabajo evaluamos los efectos del ibrutinib y dos iBTK de segunda generación, acalabrutinib y spebrutinib, sobre macrófagos y neutrófilos, como así también su interacción con otros agentes terapéuticos. Para esto, evaluamos el efecto de los diferentes iBTK sobre la respuesta in vitro de macrófagos y neutrófilos, obtenidos tanto de dadores sanos como de pacientes con LLC, a distintos estímulos microbianos tales como M. tuberculosis, C. albicans y A. fumigatus. Encontramos que el ibrutinib inhibió la respuesta de los macrófagos a los distintos estímulos microbianos evaluados, en particular a M. tuberculosis, y también la polarización hacia el perfil pro-inflamatorio M1. Además, el ibrutinib inhibió la activación de los neutrófilos en respuesta a estímulos fúngicos y su capacidad de impedir el crecimiento de A. fumigatus. En cuanto a los iBTK de segunda generación, encontramos que el spebrutinib no afectó ni la activación ni el fenotipo de los macrófagos, mientras que el acalabrutinib mostró los mismos efectos inhibitorios que el ibrutinib. Por otro lado, los iBTK de segunda generación inhibieron la activación de los neutrófilos de forma similar que el ibrutinib. Por último, al analizar la interacción de los iBTK con anticuerpos anti-CD20 de uso clínico en LLC, encontramos que el acalabrutinib fue el único que no inhibió los mecanismos efectores de estos anticuerpos. En conclusión, los resultados obtenidos en esta tesis sugieren que los iBTK podrían estar disminuyendo la respuesta inmune innata antimicrobiana en los pacientes, y que la utilización del iBTK de segunda generación acalabrutinib podría aumentar la eficacia de las terapias combinadas de iBTK con anti-CD20.
CLL is the most common adult leukemia in Western countries. The use of Bruton tyrosine kinase inhibitors (BTKi) is a new and successful therapeutic strategy in CLL. One of the main adverse effect of ibrutinib treatment, the first BTKi approved for use in patients, is the development of infections, including those cause by mycobacteria and fungi. The effects of BTKi on innate immune cells that play a key role in the development of an effective antimicrobial response against these types of pathogens have not been studied in depth. In this work we evaluated the effects of ibrutinib and two second-generation BTKi, acalabrutinib and spebrutinib, on macrophages and neutrophils, as well as their interaction with other therapeutic agents. We found that ibrutinib inhibited macrophage response to microbial stimuli, in particular the response against Mycobacterium tuberculosis, as well as macrophage polarization towards the pro-inflammatory M1 profile. Furthermore, ibrutinib inhibited neutrophil activation in response to fungal stimulation and its ability to prevent the growth of A. fumigatus. Regarding second-generation BTKi, we found that spebrutinib did not affect macrophage activation or phenotype, while acalabrutinib showed the same inhibitory effects as ibrutinib. On the other hand, both second-generation BTKi inhibited neutrophil activation similar to ibrutinib. Finally, when we analysed the interaction of BTKi with anti-CD20 antibodies employed for CLL treatment, we found that acalabrutinib was the only one that did not affect the effector mechanisms of these antibodies. In conclusion, our results suggest that BTKi could impair the antimicrobial innate immune response from patients, and that the use of the second-generation BTKi acalabrutinib may increase the efficacy of anti-CD20 therapeutic antibodies.
Fil: Colado, Ana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.