Factores genéticos del hospedero asociados a la enfermedad de Chagas : transmisión vertical y cardiopatía chagásica crónica

• Autores: Juiz, Natalia Anahí
• Año de publicación: 2017
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Schijman, Alejandro Gabriel; Longhi, Silvia A.
• Materia: TRYPANOSOMA CRUZI; INFECCION CONGENITA; CARDIOPATIA CHAGASICA CRONICA; POLIMORFISMOS GENETICOS; PLACENTA; EXPRESION GENICA; TRYPANOSOMA CRUZI; CHRONIC CHAGAS CARDIOMYOPATHY; CONGENITAL INFECTION; GENETIC POLYMORPHISMS; PLACENTA; GENE EXPRESSION
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

La enfermedad de Chagas es producto de una compleja interacción entre factores ambientales, del parásito Trypanosoma cruzi y del hospedero. En el marco de esta Tesis nos hemos enfocado en describir el rol que estos últimos juegan en dos escenarios de alto impacto en salud pública como son la transmisión congénita y la cardiopatía chagásica crónica. La transmisión congénita es parcialmente responsable de la urbanización del Chagas, que puede perpetuarse en sucesivas generaciones. Aún no han sido esclarecidos los mecanismos que la placenta ofrece en defensa contra la infección, así como tampoco por qué solo una proporción de niños nacidos de madres infectadas adquieren Chagas congénito. Con el objetivo de describir la respuesta genética del microambiente placentario producido frente a la infección, hemos realizado un estudio de genómica funcional a través de un microarreglo en modelo murino C57BL/6J, comparando placentas de animales no infectados e infectados por dos cepas de T. cruzi: K98, no letal y miotrópica y VD, aislada de un caso humano de infección congénita. Nuestro análisis de redes biológicas sugiere que el microambiente placentario ejerce una fuerte respuesta inmune en detrimento del metabolismo celular modulada por la cepa parasitaria. Más aún, las diferencias encontradas entre ambas cepas podrían ser el resultado de un tropismo placentario observado en VD. Por otra parte, en el marco de esta Tesis se han evaluado polimorfismos de nucleótido simples (SNPs) en genes que codifican para enzimas de expresión placentaria como marcadores genéticos de susceptibilidad a esta transmisión. Para analizar dicha asociación hemos realizado un estudio del tipo caso-control comparando dos grupos de niños con y sin infección congénita nacidos de madres seropositivas. Para la genotipificación de las muestras de ADN humano, hemos diseñado técnicas de análisis de curvas de disociación de alta resolución para análisis de SNPs y de electroforesis capilar para análisis de microsatélites. Los resultados obtenidos del estudio de 11 sitios sugieren un papel importante en la infección congénita por parte de los polimorfismos en los genes de las proteínas MMP2 y ADAM12, implicadas en procesos de remodelación de la matriz extracelular y en la respuesta inmune. El último objetivo de este trabajo ha sido evaluar polimorfismos en los genes CCR2y CCR5 como posibles marcadores genéticos de susceptibilidad a desarrollar la cardiopatía chagásica crónica en poblaciones originarias de Argentina. En particular, hemos encontrado que individuos de la etnia wichi, con menor prevalencia de problemas cardíacos, no presentan una de las mutaciones en CCR5, que es factor de riesgo en poblaciones no-wichi.
Chagas disease is caused by a complex interaction of environmental factors, Trypanosoma cruzi parasite and host. As part of this Thesis, we have focused on describing the role that host factors play in two scenarios of high public health impact, as congenital transmission and chronic Chagas cardiomyopathy. Congenital transmission is partially responsible for the urbanization of Chagas, which can remain in the following generations. Until now, it has not been elucidated the mechanisms that the placenta provides as defense against infection, nor why only a proportion of children born to infected mothers acquire congenital Chagas. In order to describe the genetic response of the placental environment produced during infection, we performed a study of functional genomics using a microarray approach in a C57BL/6J murine model, comparing placentas from uninfected and infected animals by two strains of T. cruzi: K98, a non-lethal myotropic strain and VD, isolated from a human case of congenital infection. The analysis of biological networks suggests that the placenta environment exerts a strong immune response to the detriment of cell metabolism modulated by the parasitic strain. Moreover, the differences between the two strains could be the result of a stronger placental tropism in the VD strain. Moreover, in the framework of this Thesis, we have evaluated single nucleotide polymorphisms (SNPs) in genes coding for enzymes of placental expression as genetic markers of susceptibility to vertical transmission. To analyze the association, we performed a case-control study comparing two groups of children with and without congenital infection born to seropositive mothers. In order to genotype human DNAsamples, we have designed techniques of high resolution melting analyses for SNPs discrimination and capillary electrophoresis for analysis of microsatellites. The results of the 11 loci studied suggest an important role in congenital infection by human polymorphisms in genes coding for MMP2 and ADAM12 proteins, involved in extracellular matrix remodeling processes and in immune response. The last aim of this research was to evaluate polymorphisms in CCR2 and CCR5genes as potential genetic markers of susceptibility to develop chronic Chagas cardiomyopathy in populations from Argentina. In particular, we have found that individuals belonging to the wichi ethnia, with lower prevalence of heart problems, do not exhibit one of the mutations in CCR5, a risk factor in non-wichi populations.
Fil: Juiz, Natalia Anahí. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.