PECAM-1/CD31 en células tumorales : ¿un nuevo blanco para la terapia antiotumoral?

• Autores: Lutzky, Viviana Paula
• Año de publicación: 2002
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Chuluyán, Héctor Eduardo
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Las moléculas de adhesión han sido implicadas en la metástasis y la progresióntumoral. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la expresión y el rol de lasmoléculas de adhesión, en particular PECAM-l/CD31 en las células tumoraleshumanas. PECAM-l/CD31 es una glicoproteína de 130kDa perteneciente a lasuperfamilia de Inmunoglobulinas. Se encuentra presente en células endoteliales,plaquetas y en la mayoría de los leucocitos. Sin embargo, en este trabajo sedemostró, por inmunofluorescencia y Western blot, la presencia de la molécula enlíneas de células de melanoma y de adenocarcinoma. La expresión cuantitativa ycualitativa de PECAM-l/CD31 sobre las células tumorales es diferente a la de losleucocitos y células endoteliales, ya que en las células tumorales la expresión esmenor, y además, los anticuerpos monoclonales dirigidos contra los dominios-2 y —6 no reaccionan con la molécula. La expresión de PECAM-l/CD31 sobre lasuperficie de las células tumorales fue modulada por interacciones célula-célula,siendo mayor en las células provenientes de cultivos sub-confluentes y en lascélulas desprendidas espontáneamente de monocapas de células tumoralesconfluentes. La fijación y la permeabilización de las células tumorales reveló lapresencia de reservorios intracelulares de PECAM-l/CD31. Por otro lado, laexpresión de PECAM-l/CD31 aumentó y disminuyó en presencia de citocalasina By brefeldina A, respectivamente. Las células de melanoma se adhirieron a células endoteliales y a proteínas dematriz extracelular. En el primer caso, la adhesión fue parcialmente mediada por PECAM-l/CD31, ya que la transfección de las células de melanoma con unoligonucleótido antisentido para PECAM-l/CD31, disminuyó la expresión de estamolécula y su adhesión. Lo mismo sucedió al tratar las células tumorales conanticuerpos dirigidos contra los dominios-1, —3 y —4/—5. En cambio la adhesión alas distintas proteínas de matriz extracelular fue mediada por las integrinas α1 (paracolágeno IV); α3 (para matrigel, laminina, colágeno IV y colágeno I); α4 y α5 (parafibronectina); α6 (para matrigel) y β1 (para matrigel, colágeno IV, colágeno I yfibronectina). Finalmente, la coligación de PECAM-l/CD31 con anticuerposdirigidos contra el dominio 3 en las células de melanoma y adenocarcinoma, tieneun efecto inhibitorio sobre la proliferación celular. Los resultados obtenidos en el presente trabajo, indican que existe un reservoriointracelular de PECAM-l/CD31 en células tumorales que probablemente module laexpresión de CD31 en la superficie celular. Además sugieren un rol de estamolécula en el crecimiento tumoral y en la metástasis.
Tumor progression and metastasis have been related to the adhesion moleculesexpression. The aim of the present study was to examine the expression and therole of adhesion molecules on tumor cells, in particular PECAM-l/CD31. PECAM-l/CD31 is a 130-kDa member of the Immunoglobulin gene superfamilythat is highly expressed on endothelial cells, platelets and most leukocytes. However, herein it is demonstrated by Western Blot and immunofluorescence thatsome melanoma cells and adenocarcinoma cells express PECAM-l/CD31 on thecell surface. The expression of PECAM-l/CD31 on tumor cells seems to bedifferent from normal cells, since the expression was low compared to endothelialcells and leukocytes, and based on the absence of reactivity of monoclonalantibodies directed to domains 2 and 6. Furthermore, the tumor cells surfaceexpression of PECAM-l/CD31 can be regulated by cell-cell contact, being higheron sparse and spontaneously detached cells. Fixing and permeabilizing tumor cellsrevealed a cytoplasmic pool of the molecule. Indeed, cell surface CD31 wasinternalized following mAb binding and the expression was enhanced anddecreased by cytochalasin B and brefeldin A, respectively. Melanoma cells were able to adhere to endothelial cells and to extracellular matrixproteins, using different adhesion molecules. The interaction of melanoma cellswith endothelial cells was partially mediated by PECAM-l, since decreasing theexpression of CD31 on tumor cells by CD31-specific antisense oligonucleotide orby treatment with mAbs to domains -1, -3, -4/—5 decreased the adhesion toendothelium. Melanoma cells adhesion to ECM proteins was mediated by α1 (for collagen type IV); α3 (for matrigel, laminin, collagen type IV and collagen type I); α4 and α5 (forfibronectin); α6 (for matrigel) and β1 (for matrigel, collagen type IV, collagen type Iand fibronectin). Furthermore, ligation of CD31 via domain —3 but not β1 integrininhibited proliferation of melanoma and adenocarcinoma cells. Overall, theseresults indicate that there is an intracellular pool of CD31 on tumor cells whichmight modulate CD31 surface expression and its role in cancer cell growth andmetastasis.
Fil: Lutzky, Viviana Paula. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.