Péptidos bioactivos de origen microbiano de interés para el desarrollo de alimentos funcionales

• Autores: Spontón, Pablo Gabriel
• Año de publicación: 2016
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Simonetta, Arturo Carlos; Lurá, María Cristina; Meinardi, Carlos Arberto; Garro, Oscar Alfredo; Tonarelli, Georgina Guadalupe
• Materia: Peptides; Glycopeptides; Acetylcholinesterase; Antimicrobial activity; Angiotensin converting enzyme; Mannoproteins; Péptidos; Glicopéptidos; Acetilcolinesterasa; Actividad antimicrobiana; Enzima convertidora de angiotensina; Manoproteínas
• Institución: Universidad Nacional del Litoral

Fil: Spontón, Pablo Gabriel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina.
Se investigó la actividad inhibitoria in vitro frente a la enzima acetilcolinesterasa (AChE) y a la enzima convertidora de angiotensina (ECA) tanto como la actividad antimicrobiana de péptidos obtenidos por hidrólisis enzimática de manoproteínas extraídas de cepas de levaduras, y de hidrolizados proteicos (HP) obtenidos de cultivos de bacterias ácido lácticas y levaduras en soluciones de caseína y del hidrolizado comercial NZ-case Plus. La actividad inhibitoria de todos los extractos hidrolizados de manoproteínas contra ECA fue baja o nula. Se observó actividad antimicrobiana contra las cepas de Listeria monocytogenes tipo I DTUNLu 328 y Bacillus cereus DBFIQ B28. Los extractos de manoproteínas mostraron un efecto bacteriostático en las poblaciones de las células proliferantes tanto de B. cereus y L. monocytogenes. Se observó una amplia actividad inhibitoria frente a AChE, con un máximo de inhibición de 59%. El fraccionamiento de los extractos seleccionados por cromatografía en fase reversa permitió obtener 6 fracciones con significante actividad inhibitoria contra AChE. Se detectaron péptidos principalmente hidrofílicos, con un peso molecular comprendido entre 700 y 4800Da. Se determinó la presencia de azucares en todas las fracciones. Las fracciones más activas fueron separadas por cromatografía de afinidad. Los resultados demostraron que las fracciones glicopeptídicas presentaron la mayor inhibición contra AChE, con valores de actividad que varían entre 49,3 y 77,8%. El método de obtención de los HP libres de células fue adecuado en todos casos. La actividad inhibitoria contra AChE y ECA fue baja o nula. Ninguno de los HP presentó actividad inhibitoria contra las cepas bacterianas estudiadas. Como conclusión final de este trabajo de Tesis, podemos decir que las propiedades antiacetilcolinesterasa, junto con la actividad antimicrobiana, hacen a las fracciones peptídicas bioactivas potencialmente adecuadas para su uso como aditivos para alimentos funcionales y/o como agentes terapéuticos.
The aim of this Thesis was to study the enzyme inhibitory activities against acetylcholinesterase (AChE) and angiotensin converting enzyme (ACE) of peptides and glycopeptides produced by enzymatic hydrolysis of mannoproteins, isolated from different yeast strains. The antimicrobial activity of hydrolizated of mannoproteins and hydrolysates obtained from cultures of lactic acid bacteria and yeasts (PH) from casein and commercial hydrolysed NZ-Case Plus solutions were also investigated. The Inhibitory activity of all hydrolyzated mannoproteins extracts against ACE was nil or low. Antimicrobial activity against Listeria monocytogenes type I DTUNLu 328 and Bacillus cereus DBFIQ B28 bacteria was only observed. Mannoprotein extracts showed a bacteriostatic effect on the proliferating cell populations of the strains of B. cereus and L. monocytogenes, respectively. A wide inhibitory activity against AChE was observed, with a maximum inhibition of 59%. Fractionation of the selected mannoprotein extracts by reverse-phase chromatography allowed obtaining 6 fractions with significant inhibitory activity against AChE. Peptides mainly hydrophilic, with molecular weight in the range of 700 to 4800Da, were detected. The presence of sugars in all fractions was determined. The most active fractions were separated by affinity chromatography. Results demonstrated that glycopeptide fractions showed greater inhibition against AChE than peptide fractions, with activity values ranging between 49.3 and 77.8%. The inhibitory activity of PH against both enzymes, either AChE or ACE, was nil or low. None of the PH presented antimicrobial activity against the bacterial strains tested. As final conclusion, we can say that anti-aceltycholinesterase property, together with the antimicrobial activity make the bioactive peptide fractions potentially suitable for use as functional food additives and/or as therapeutic agents.
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