Efecto del sildenafil sobre la regeneración ósea guiada. Estudio experimental en ratas

Autores
Brenna, Esteban Matías; D'itria, José Antonio; Reati, Carolina; Centeno, Viviana Andrea; Fontanetti, Pablo Alejandro
Año de publicación
2019
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Fil: Brenna, Esteban Matías. Asociación Odontológica de Córdoba; Argentina.
Fil: D'itria, José Antonio. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Prostodoncia B; Argentina.
Fil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.
Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.
Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Departamento de Biología Bucal; Argentina.
La regeneración ósea guiada es un proceso mediante el cual se forma nuevo hueso en una zona donde éste se perdió. Uno de los factores claves en dicho proceso es la vascularización del área. El citrato de sildenafil es un inhibidor de la fosfodiesterasa-5 y como vasodilatador, ha mostrado beneficios en diferentes modelos experimentales y estudios clínicos. Objetivo: evaluar el efecto del sildenafil en el proceso de regeneración ósea guiada en un defecto en calotas de ratas. Métodos: se utilizarán 30 ratas Wistar macho de 30 días de edad. A 24 animales se les practicará un defecto óseo en calota y desde el día posterior a la cirugía se les administrará, mediante sonda orogástrica, solución fisiológica (Grupo Control; n=12) o solución de citrato de sildenafil en una dosis de 10mg/kg de peso corporal (Grupo Tratado, n=12). A seis animales se les administrará citrato de sildenafil en la misma dosis que el Grupo Tratado pero no se les practicará el defecto óseo (Grupo Control negativo). Los animales serán sacrificados por dislocación cervical a los días 7, 14 ó 28 de tratamiento. Se tomarán muestras de sangre para medir parámetros de metabolismo fosfocálcico. Se extraerán las calotas en la zona regenerada y serán procesadas para estudios histomorfométricos, moleculares y biomecánicos. Las calotas serán fijadas con una solución de formaldehido-PBS al 10% pH 7.4 durante 24 horas y luego se descalcificaran con solución de EDTA. Posteriormente se procesaran para estudios histológicos e histoquímicos. Se realizarán cortes frontales seriados de 6 µm de espesor al nivel del defecto óseo. Algunos cortes serán coloreados con hematoxilina-eosina (H&E) para medir volumen óseo [BV/TV (%)], número de osteoblastos (N.Ob/mm2), número de osteocitos (N.Ot/mm2), número de osteoclastos (N.Oc/mm2) y superficie ósea en formación [Ob.S/BS (%)]. Otros cortes serán coloreados para detección de la fosfatasa ácida tartrato resistente (TRAP) y se determinará el número de Oc TRAP positivos, número de Oc TRAP negativos y la superficie trabecular TRAP positiva. En el tejido óseo neoformado la expresión de moléculas como osteocalcina, sialoproteína ósea, RANK, RANK-L y osteoprotegerina (OPG). La resistencia ósea del tejido óseo neoformado se determinará mediante ensayos de compresión. Los resultados serán analizados estadísticamente mediante ANOVA y test post hoc de Bonferroni, fijando un valor p<0,05 para diferencias significativas entre los grupos estudiados.
Fil: Brenna, Esteban Matías. Asociación Odontológica de Córdoba; Argentina.
Fil: D'itria, José Antonio. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Prostodoncia B; Argentina.
Fil: Reati, Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.
Fil: Centeno, Viviana Andrea. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica A; Argentina.
Fil: Fontanetti, Pablo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Departamento de Biología Bucal; Argentina.
Bioquímica y Biología Molecular (ídem 1.6.3)
Materia
Regeneración ósea
Citrato de sildenafil
Ratas
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
Repositorio
Repositorio Digital Universitario (UNC)
Institución
Universidad Nacional de Córdoba
OAI Identificador
oai:rdu.unc.edu.ar:11086/555445

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La regeneración ósea guiada es un proceso mediante el cual se forma nuevo hueso en una zona donde éste se perdió. Uno de los factores claves en dicho proceso es la vascularización del área. El citrato de sildenafil es un inhibidor de la fosfodiesterasa-5 y como vasodilatador, ha mostrado beneficios en diferentes modelos experimentales y estudios clínicos. Objetivo: evaluar el efecto del sildenafil en el proceso de regeneración ósea guiada en un defecto en calotas de ratas. Métodos: se utilizarán 30 ratas Wistar macho de 30 días de edad. A 24 animales se les practicará un defecto óseo en calota y desde el día posterior a la cirugía se les administrará, mediante sonda orogástrica, solución fisiológica (Grupo Control; n=12) o solución de citrato de sildenafil en una dosis de 10mg/kg de peso corporal (Grupo Tratado, n=12). A seis animales se les administrará citrato de sildenafil en la misma dosis que el Grupo Tratado pero no se les practicará el defecto óseo (Grupo Control negativo). Los animales serán sacrificados por dislocación cervical a los días 7, 14 ó 28 de tratamiento. Se tomarán muestras de sangre para medir parámetros de metabolismo fosfocálcico. Se extraerán las calotas en la zona regenerada y serán procesadas para estudios histomorfométricos, moleculares y biomecánicos. Las calotas serán fijadas con una solución de formaldehido-PBS al 10% pH 7.4 durante 24 horas y luego se descalcificaran con solución de EDTA. Posteriormente se procesaran para estudios histológicos e histoquímicos. Se realizarán cortes frontales seriados de 6 µm de espesor al nivel del defecto óseo. Algunos cortes serán coloreados con hematoxilina-eosina (H&E) para medir volumen óseo [BV/TV (%)], número de osteoblastos (N.Ob/mm2), número de osteocitos (N.Ot/mm2), número de osteoclastos (N.Oc/mm2) y superficie ósea en formación [Ob.S/BS (%)]. Otros cortes serán coloreados para detección de la fosfatasa ácida tartrato resistente (TRAP) y se determinará el número de Oc TRAP positivos, número de Oc TRAP negativos y la superficie trabecular TRAP positiva. En el tejido óseo neoformado la expresión de moléculas como osteocalcina, sialoproteína ósea, RANK, RANK-L y osteoprotegerina (OPG). La resistencia ósea del tejido óseo neoformado se determinará mediante ensayos de compresión. Los resultados serán analizados estadísticamente mediante ANOVA y test post hoc de Bonferroni, fijando un valor p<0,05 para diferencias significativas entre los grupos estudiados.
Fil: Brenna, Esteban Matías. Asociación Odontológica de Córdoba; Argentina.
Fil: D'itria, José Antonio. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Prostodoncia B; Argentina.
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