Secuenciación y análisis de dos genomas bacterianos; Thermus sp. 2.9 y Bacillus thuringiensis INTA Fr7-4 : identificación y análisis funcional de proteínas/enzimas con aplicación a...

• Autores: Navas, Laura Emilce
• Año de publicación: 2016
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Amadío, Ariel F.; Teves, Sergio; Berretta, Marcelo F.; Mollerach, Marta; Soria, Marcelo; Campos, Eleonora
• Materia: Genomas bacterianos; Thermus SP 2.9; Bacillus thuringiensis; Inta FR7-4; Misiones (Provincia); Ciencia de la vida
• Institución: Universidad de Buenos Aires

Genome sequencing of native microorganisms represents a versatile tool to examine their\nbiodiversity and the exploitation of their genes in biotechnological applications. DNA sequencing of the complete genome of two bacterial isolates from Argentina was undertaken using next-generation technologies. The first one corresponds to a thermophilic bacterium of\nthe genus Thermus, whose interest is based on its thermophilic enzymes. From a genetic perspective, this isolate is close to Thermus aquaticus. Five enzyme-coding genes useful in many industrial applications were expressed in E. coli and the product of two of them, a phospholipase and a laccase were analysed functionally. Both enzymes showed optimal activity and thermostability at high temperatures. The other sequenced genome corresponds to an isolate of Bacillus thuringiensis, a species known for the production of insecticidal\ncrystals during sporulation. We obtained the complete sequence of a novel megaplasmid which includes 8 insecticidal genes of the cry and vip types, which are arranged in a pathogenicity island. Two cry8 genes were expressed separately in an acrystalliferous strain\nof B. thuringiensis, leading to the formation of ovoid crystals in the recombinant strains. The toxicity against larvae of Anthonomus grandis (Coleoptera) of one recombinant strain was\nsimilar to that of the native isolate.
Fil: Navas, Laura Emilce. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina
La secuenciación de genomas de microorganismos nativos permite profundizar el\nconocimiento de la diversidad biológica y el aprovechamiento de sus genes en aplicaciones\nbiotecnológicas. En este trabajo se realizó la secuenciación masiva del ADN de dos bacterias\nautóctonas de Argentina. Una de ellas es una bacteria termófila del género Thermus, de\ninterés por las características de sus enzimas termofílicas. Comparaciones a nivel genético demostraron que comparte más genes con Thermus aquaticus. Cinco de sus genes con\npotencial aplicación industrial se expresaron en E. coli, y dos de ellos fueron seleccionados\npara realizar un análisis funcional. Se produjeron dos enzimas, una fosfolipasa y una lacasa;\nse evaluó la termoestabilidad de ambas y se determinaron condiciones óptimas de su\nactividad. El otro genoma secuenciado correspondió a un aislamiento de Bacillus thuringiensis, especie conocida por la formación de cristales parasporales con actividad\ninsecticida durante la esporulación. Se obtuvo la secuencia completa de un nuevo megaplásmido, en donde 8 genes insecticidas de tipo cry y vip se disponen en una isla de\npatogenicidad. Dos genes cry8 se expresaron en una cepa acristalífera de B. thuringiensis, dando lugar a cristales ovoides. Su toxicidad fue examinada contra larvas de Anthonomus grandis (Coleoptera), obteniéndose para uno de ellos toxicidad comparable a la del cristal de la cepa nativa.
Doctora de la Universidad de Buenos Aires en Biotecnología