Síndrome diarreico en potrillos, diagnóstico y caracterización de los agentes virales involucrados

• Autores: Miño, Samuel
• Año de publicación: 2017
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Barrandeguy, Maria Edith (directora); Parreño, Gladys (co-directora)
• Materia: Enfermedades de los Animales; Caballos; Diarrea; Diagnóstico; Rotavirus; Animal Diseases; Horses; Diarrhoea; Diagnosis; Equinos
• Institución: Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria

Tesis para optar al grado de Doctor en Ciencias Veterinarias Virología, presentado a Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Veterinarias, en 2017
Las diarreas neonatales representan uno de los síndromes clínicos más relevantes y frecuentes en potrillos menores de 6 meses de edad. Rotavirus grupo A (RVA) es el principal agente viral asociado a diarreas en potrillos, a nivel mundial. Sin embargo, en aproximadamente el 50% de los casos de diarrea no se puede establecer su etiología. Por estos motivos, los objetivos de este trabajo fueron, profundizar el conocimiento de la epidemiología molecular y, de las características evolutivas y estructurales de RVA equino, y estudiar la presencia de otros agentes virales como posibles causantes de diarreas en potrillos de nuestro país. El estudio de RVA equino comenzó con la determinación de la sensibilidad y especificidad de tres metodos de diagnóstico. En segundo lugar, se estudió la epidemiología molecular de los RVA circulantes en equinos durante el período 2009 – 2014. Las variantes G3P[12] y G14P[12] fueron las cepas detectadas con una prevalencia cíclica y alternada entre los años bajo estudio. Con todas las cepas disponibles se realizó un estudio evolutivo, determinándose la monofilia de los RVA equinos de Argentina. Se identificó el genotipo E12 -correspondiente al gen codificante de la enterotoxina viral NSP4- como un indicador geográfico que permitió trazar la evolución de los RVA equino de Sudamérica, desde la primera fundación de Buenos Aires en 1536. El resultado obtenido permite plantear la hipótesis de una infección inter especie que dio origen a una cepa emergente resultado de la reasociación de genes entre las cepas de RVA de animales autóctonos (guanacos) y las cepas de RVA de los animales introducidos (equinos y bovinos). Se detectó el fenómeno de transferencia y fijación del genotipo E12 autóctono en las cepas de RVA circulantes en equinos y bovinos de Sudamérica. El estudio de RVA equino incluyó también un análisis estructural que permitió explicar el ligamiento genético observado entre las variantes de las proteínas estructurales VP7 y VP6. Finalmente, mediante la tecnología de “next generation sequencing”, se estudió el viroma de la materia fecal de potrillos con diarrea. Así se determinó la presencia de otros agentes virales, potenciales causantes de diarrea. En conclusión, este trabajo profundizó aspectos relacionados con el diagnóstico de RVA equino, aportando datos novedosos respecto a los procesos evolutivos, filodinámicos y estructurales que podrían extrapolarse a otros virus de genoma segmentado. Asimismo, se describió por primera vez el viroma de materia fecal de potrillos con diarrea, sugiriendo otros posibles agentes causales. Nuestros resultados enfatizan la importancia de realizar una vigilancia epidemiológica continua de las diarreas en potrillos, profundizar en la identificación y caracterización de los agentes virales asociados, con el fin último de realizar el diseño racional de nuevas herramientas de prevención y control.
Neonatal diarrhea is one of the most relevant and frequent syndromes in foals younger than six month of age. Group A Rotavirus (RVA) is the main viral agent associated to diarrhea in foals, worldwide. However, around 50% of the diarrhea episodes remain without an etiological diagnosis. The aims of the present work were, to go in detail into the molecular epidemiology, the evolutive and structural characteristics of equine RVA and to investigate the presence and role of other viral agents as potential causes of diarrhea in Argentinean foals. The study in equine RVA started with the evaluation of the sensitivity and specificity of tree diagnosis tests. Secondly, we studied the molecular epidemiology of the RVA circulating in Argentinean foals from 2009 to 2014. The G3P[12] and G14P[12] genotypes were detected with a cyclic prevalence among the years under study. Considering all the genome sequences of the equine RVA strains available an evolutive study allowed us to determine the monophyletic clustering of the equine RVA detected in Argentina. The E12 genotype -encoding the viral enterotoxin NSP4- was defined as a geographical marker which allows describing the evolution of the equine RVA present in South America since the first foundation of Buenos Aires in 1536. The obtained results led to the hypothesis that an interspecies transmission gave rise to new RVA genome constellations as a result of gene reassortment between the RVA circulating in American autochthonous species (Lama guanicoe) and the RVA of the introduced species (equine and bovine). The E12 gene from the autochthonous RVA to the equine and bovine RVA backbones were transferred and fixed. The study of equine RVA also included a structural analysis that showed the genetic linkage between the two genotypes of the VP7 and VP6 structural proteins. Finally, the virome of diarrheic samples from foals were studied by “next generation sequencing” technology. In conclusion the present work contributed new information regarding equine RVA diagnosis and addressed aspects related to evolutive, phylodynamic and structural processes of RVA that might be extrapolated to other viruses carrying segmented genomes. In addition, the analysis of the virome from samples from diarrheic foals allowed us to detect other potential viral agents associated to diarrhea in equines. Our results remark the important of conducting the continuous surveillance of diarrhea in foals, the identification and characterization of the associated viral agents with the final goal of the rationale design of new control and preventive tools.
Instituto de Virología
Fil: Miño, Samuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina