Catecholamine-β-alanyl ligase in the medfly Ceratitis capitata
- Autores
- Pérez, Martín Mariano; Wappner, Pablo; Quesada Allue, Luis Alberto
- Año de publicación
- 2002
- Idioma
- inglés
- Tipo de recurso
- artículo
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- Dopamine (DA) and norepinephrine (NE) derivatives play an important role in the sclerotization and pigmentation of insect cuticles by serving as precursors for cuticular cross-linking. Protein preparations from prepupae of the medfly, Ceratitis capitata, were able to conjugate beta-alanine with DA producing N-beta-alanyldopamine (NBAD) or with NE, synthesizing N-beta-alanylnorepinephrine (NBANE). The latter reaction has been demonstrated for the first time. Apparent kinetic parameters were obtained for both substrates, DA (V(max)=30.7+/-6.0 pmol min(-1) mg(-1); K(m)=29.5+/-3.5 microM) and NE (V(max)=16.1+/-6.6 pmol min(-1)mg(-1); K(m)=89.0+/-8.3 microM). The same protein seems to be responsible for both enzymatic activities, judging from several criteria like identical behavior under heat inactivation as well as identical Mg2+ and Mn2+ dependent stimulation and Co2+ inhibition. Furthermore, the melanic mutants niger of C. capitata and ebony(4) of D. melanogaster, known to be defective for NBAD synthase, were also unable to synthesize NBANE. The protein preparation acylated tyrosine with much less efficiency, to produce sarcophagine (beta-alanyltyrosine). Strikingly, extracts from the melanic mutants were unable to synthesize sarcophagine. Our results strongly suggest that the enzymatic activity previously known as NBAD synthase is in fact a novel catalytic protein showing broad substrate specificity. We propose to identify it as catecholamine-beta-alanyl ligase.
Fil: Pérez, Martín Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Fil: Wappner, Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Fil: Quesada Allue, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina - Materia
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