Cross-talk between adipocytes and breast cancer cells: modulation of Nuclear Receptor Coactivator 3 in fat cells

Autores
Lira, María Cecilia; Rosa, Francisco Damián; Soares Machado, Mileni; Palma, Alejandra Graciela; Marino, Gabriela Inés; Costas, Monica Alejandra; Rubio, Maria Fernanda
Año de publicación
2020
Idioma
inglés
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Adipocytes account for the largest proportion among the cells that comprise breast tissue. Although they are considered to be a critical cell type in the tumor microenvironment of breast cancer, there is still unclear the molecular mechanisms that control their behavior in this context. We have demonstrated that the transcriptional coactivator RAC3 decreases during adipogenesis and its high expression in adipose tissue adjacent to breast tumors correlate with different markers of tumoral progression in patient samples. Therefore, the aim of this work was to further study the role of this molecule in an in vitro model. Conditioned media (CM) were collected from nontumoral or tumoral breast human cell lines with the following RAC3 mRNA levels: MCF10A: 1.55 ± 0.73, MDA-MB-231: 167.20 ± 6.91, T47D: 571.00 ± 12.59. 3T3-L1 derived-murine adipocytes were stimulated with CM or serum-free medium. RAC3 expression levels measured by qPCR resulted significantly higher in adipocytes stimulated with CM from high RAC3 levelsexpressing T47D cells (9.25 ± 1.02) compared to the other conditions: basal (1.00 ± 0.00), MCF10A (2.33 ± 0.96), MDAMB-231 (2.80 ± 1.19) (p<0.05). As RAC3 is a NF-kB coactivator we studied by immunofluorescence the presence of its phosphorylated subunit p65. We observed a greater fluorescence intensity in nucleus when adipocytes were stimulated with CM from tumoral cell lines (MDA-MB-231 or T47D) compared to the other conditions. Even more, since TNF is a NF-kB target gene, we evaluated by dot plot its levels in CM from adipocytes poststimulation. Adipocytes secreted more TNF after being stimulated with CM from T47D (1.41 ± 0.03) compared to all other conditions: basal (1.00 ± 0.00), MCF10A (1.08 ± 0.11), MDAMB-231 (1.02 ± 0.04) (p<0.05). The values were relativized to basal condition and results are shown as the mean ± SEM. These results validate our previous findings and suggest RAC3 as a molecular key to understand changes in the adipokines pattern in the tumor context.
Fil: Lira, María Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Rosa, Francisco Damián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Soares Machado, Mileni. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Palma, Alejandra Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Marino, Gabriela Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Costas, Monica Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Rubio, Maria Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
LXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratorio
Mar del Plata
Argentina
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Nivel de accesibilidad
acceso abierto
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Institución
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Therefore, the aim of this work was to further study the role of this molecule in an in vitro model. Conditioned media (CM) were collected from nontumoral or tumoral breast human cell lines with the following RAC3 mRNA levels: MCF10A: 1.55 ± 0.73, MDA-MB-231: 167.20 ± 6.91, T47D: 571.00 ± 12.59. 3T3-L1 derived-murine adipocytes were stimulated with CM or serum-free medium. RAC3 expression levels measured by qPCR resulted significantly higher in adipocytes stimulated with CM from high RAC3 levelsexpressing T47D cells (9.25 ± 1.02) compared to the other conditions: basal (1.00 ± 0.00), MCF10A (2.33 ± 0.96), MDAMB-231 (2.80 ± 1.19) (p<0.05). As RAC3 is a NF-kB coactivator we studied by immunofluorescence the presence of its phosphorylated subunit p65. We observed a greater fluorescence intensity in nucleus when adipocytes were stimulated with CM from tumoral cell lines (MDA-MB-231 or T47D) compared to the other conditions. Even more, since TNF is a NF-kB target gene, we evaluated by dot plot its levels in CM from adipocytes poststimulation. Adipocytes secreted more TNF after being stimulated with CM from T47D (1.41 ± 0.03) compared to all other conditions: basal (1.00 ± 0.00), MCF10A (1.08 ± 0.11), MDAMB-231 (1.02 ± 0.04) (p<0.05). The values were relativized to basal condition and results are shown as the mean ± SEM. These results validate our previous findings and suggest RAC3 as a molecular key to understand changes in the adipokines pattern in the tumor context.Fil: Lira, María Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Rosa, Francisco Damián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. 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Fil: Rosa, Francisco Damián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
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Fil: Palma, Alejandra Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Marino, Gabriela Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Costas, Monica Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Rubio, Maria Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
LXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratorio
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