1α,25(oh)2 d3 -glycosides and synthetic 1α,25(oh)2 d3 actions in cell cycle and myogenesis of c2c12 skeletal muscle cells

Autores
Irazoqui, Ana Paula; de Genaro, Pablo Adrian; Buitrago, Claudia Graciela; Bachmann, Heini; Bühler, Katerine; González Pardo, María Verónica; Russo de Boland, Ana
Año de publicación
2017
Idioma
inglés
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
Solanum glaucophyllum leaf´s extracts (SGE) enriched with 1a,25(OH)2VitaminD3-glucosides are available for the organism due to the presence of endogenous glycosidases. We have shown that SGE alike 1a,25(OH)2D3 (1,25D) induces myoblast differentiation. In this work, we investigate Akt role in myoblast fusion to form myotubes during differentiation. The fusion index was determine staining C2C2 cells with MitoTracker Red prior fixation, cells were then stained with DAPI, and examined by fluorescence microscopy. We found that the ability of vitamin D compounds, 1,25D or SGE, to induce myotube formation was impaired in presence of Akt inhibitor LY294002. Since Akt inhibitor suppresses myotube formation, we investigate whether Akt participates in the late differentiation marker MHC2b expression founding that its mRNA expression was induced by 1,25D and SGE in an Akt dependent manner. The commitment of myogenic cells in skeletal muscle differentiation requires earlier irreversible interruption of the cell cycle. To evaluate the effect of SGE on the distribution of C2C12 cells into different phases of the cell cycle, we performed flow cytometry assays. The studies showed that SGE, similarly to 1,25D, prompts a peak of S-phase followed by an arrest in the G0/G1-phase, events which were dependent on the MAP kinases ERK1/2, p38 and JNK. We also investigated whether 1,25D or SGE regulate the immediate early gene c-myc in C2C12 cells undergoing proliferation. We found that 1,25D nor SGE induce c-myc mRNA expression, but both compounds increase c-myc protein levels, perhaps due to a decrease in protein degradation rate. Significant differences of the data between control and treated conditions were analyzed by one way-ANOVA followed by Bonferroni test (p<0.05) or t-test (*p<0.05, **p<0.01). Taken together, these results suggest that SGE, as 1,25D, promotes myotube formation through Akt activation and regulates c-myc protein and the cell cycle through ERK1/2, p38 and JNK.
Fil: Irazoqui, Ana Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: de Genaro, Pablo Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Buitrago, Claudia Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Bachmann, Heini. Herbonis Ag; Suiza
Fil: Bühler, Katerine. Herbonis Ag; Suiza
Fil: González Pardo, María Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Russo de Boland, Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
LXII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica y Biología Molecular; LXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; Reunión de la Sociedad Argentina de Andrología; XLVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica ; XLIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; Reunión de la Sociedad Argentina de Hematología y XXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología
Buenos Aires
Argentina
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
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Sociedad Argentina de Andrología
Materia
MUSCLE CELLS
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acceso abierto
Condiciones de uso
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CONICET Digital (CONICET)
Institución
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We found that the ability of vitamin D compounds, 1,25D or SGE, to induce myotube formation was impaired in presence of Akt inhibitor LY294002. Since Akt inhibitor suppresses myotube formation, we investigate whether Akt participates in the late differentiation marker MHC2b expression founding that its mRNA expression was induced by 1,25D and SGE in an Akt dependent manner. The commitment of myogenic cells in skeletal muscle differentiation requires earlier irreversible interruption of the cell cycle. To evaluate the effect of SGE on the distribution of C2C12 cells into different phases of the cell cycle, we performed flow cytometry assays. The studies showed that SGE, similarly to 1,25D, prompts a peak of S-phase followed by an arrest in the G0/G1-phase, events which were dependent on the MAP kinases ERK1/2, p38 and JNK. We also investigated whether 1,25D or SGE regulate the immediate early gene c-myc in C2C12 cells undergoing proliferation. 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Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; ArgentinaFil: Buitrago, Claudia Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; ArgentinaFil: Bachmann, Heini. Herbonis Ag; SuizaFil: Bühler, Katerine. Herbonis Ag; SuizaFil: González Pardo, María Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. 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Fil: Irazoqui, Ana Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: de Genaro, Pablo Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Buitrago, Claudia Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Bachmann, Heini. Herbonis Ag; Suiza
Fil: Bühler, Katerine. Herbonis Ag; Suiza
Fil: González Pardo, María Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
Fil: Russo de Boland, Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina
LXII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica y Biología Molecular; LXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; Reunión de la Sociedad Argentina de Andrología; XLVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica ; XLIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; Reunión de la Sociedad Argentina de Hematología y XXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología
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