Single dilution Avidity-Blocking ELISA as an alternative to the Bovine Viral Diarrhea Virus neutralization test
- Autores
- Franco Mahecha, Olga Lucia; Ogas Castells, Maria Lorena; Combessies, G.; Lavoria, Maria de Los Angeles; Wilda, Maximiliano; Mansilla, Florencia Celeste; Seki, Cristina; Grigera, Pablo Rafael; Capozzo, Alejandra Victoria
- Año de publicación
- 2011
- Idioma
- inglés
- Tipo de recurso
- artículo
- Estado
- versión publicada
- Descripción
- This study describes the development and validation of a blocking ELISA that measures avidity of BVDV-specific immunoglobulins (Igs) as an alternative to the classic virus neutralization test. The assay comprises a recombinant soluble E2 glycoprotein as target antigen, a neutralizing serum as detector antibody and a washing-step with a chaotropic agent to determine BVDV-specific Igs avidity. Avidity-Blocking ELISA was validated with 100 negative and 87 positive BVDV-neutralization serum samples from either infected or vaccinated bovines (inactivated commercial vaccines). Specificity and sensitivity of the Avidity-Blocking ELISA were 100% and 98.8%, respectively. The assay was standardized to use a single dilution, so that 90 samples can be tested per plate. Results expressed as Avidity Index (AI) correlated with BVDV neutralizing titers (r= 0.94). Unlike the virus neutralization test, the Avidity-Blocking ELISA could discriminate between infected and vaccinated animals (DIVA), suggesting that avidity measurement can be a valuable tool to achieve DIVA compliances. The data show that the avidity of anti BVDV antibodies is related to their capacity to block viral infection in vitro.
Fil: Franco Mahecha, Olga Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; Argentina
Fil: Ogas Castells, Maria Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; Argentina
Fil: Combessies, G.. Laboratorio Azul; Argentina
Fil: Lavoria, Maria de Los Angeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fundación de Estudios en Virología Animal; Argentina
Fil: Wilda, Maximiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología ; Argentina
Fil: Mansilla, Florencia Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología ; Argentina
Fil: Seki, Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología ; Argentina
Fil: Grigera, Pablo Rafael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología ; Argentina
Fil: Capozzo, Alejandra Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología ; Argentina - Materia
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Single dilution Avidity-Blocking ELISA as an alternative to the Bovine Viral Diarrhea Virus neutralization testFranco Mahecha, Olga LuciaOgas Castells, Maria LorenaCombessies, G.Lavoria, Maria de Los AngelesWilda, MaximilianoMansilla, Florencia CelesteSeki, CristinaGrigera, Pablo RafaelCapozzo, Alejandra VictoriaAvidityBvdvSingle Dilution ElisaVirus Neutralization Testhttps://purl.org/becyt/ford/1.6https://purl.org/becyt/ford/1This study describes the development and validation of a blocking ELISA that measures avidity of BVDV-specific immunoglobulins (Igs) as an alternative to the classic virus neutralization test. The assay comprises a recombinant soluble E2 glycoprotein as target antigen, a neutralizing serum as detector antibody and a washing-step with a chaotropic agent to determine BVDV-specific Igs avidity. Avidity-Blocking ELISA was validated with 100 negative and 87 positive BVDV-neutralization serum samples from either infected or vaccinated bovines (inactivated commercial vaccines). Specificity and sensitivity of the Avidity-Blocking ELISA were 100% and 98.8%, respectively. The assay was standardized to use a single dilution, so that 90 samples can be tested per plate. Results expressed as Avidity Index (AI) correlated with BVDV neutralizing titers (r= 0.94). Unlike the virus neutralization test, the Avidity-Blocking ELISA could discriminate between infected and vaccinated animals (DIVA), suggesting that avidity measurement can be a valuable tool to achieve DIVA compliances. The data show that the avidity of anti BVDV antibodies is related to their capacity to block viral infection in vitro.Fil: Franco Mahecha, Olga Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. 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