Effect of anagrelide on megakaryocytic cytoskeleton during platelet production. Possible genes involved

Autores
Cellucci, Adela Soledad; Lev, Paola Roxana; Yañuk Danila; Goette, Nora Paula; Glembotsky, Ana Claudia; de Luca, Geraldine; Lira MC; Baroni Pietto, Maria Constanza; Heller, Paula Graciela; Marta, Rosana Fernanda
Año de publicación
2022
Idioma
inglés
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
We previously reported changes in maximum platelet diameter (MPD) in patients with Phi-negative chronic myeloproliferative neoplasms treated with different drugs. Anagrelide (ANA), alfa Interferon (IFN) and ruxolitinib (Ruxo) increased MPD, while hydroxyurea (HU) decreased MPD. Evaluation of proplatelet (PP) morphology in normal megakaryocyte (MK) culture showed that ANA and IFN increased the size of tips and swellings (structures that give rise to platelets), while Ruxo and HU did not.To deepen into possible causes of these changes during ANA treatment, two approaches were carried outA) Morphological analysis of MK cytoskeleton by indirect immunofluorescence: a trend toward decreased actin polarization was observed (phalloidin-FITC), suggesting that demarcation membrane development necessary for thrombopoiesis is abnormal. Additionally, microtubular disorganization was observed (anti-alpha tubulin-FITC) (Wilcoxon test p<0.05), which would interfere with PP elongation.B) To identify molecular targets responsible for ANA-induced cytoskeleton abnormalities, gene expression data obtained by Ahluwalia (GEO database:GSE60621) was analyzed. 81 genes were found down-regulated (Log-fold change ≤3). This group was further analyzed with Cytoscape v3.8.1 (ClueGo plugin) to build a visualization network of associated biological processes. From three groups detected, the one corresponding to Positive regulation of phospholipase activity showed topological characteristics that suggest high number of processes with potential relevance in MK. Within this group, CCL5, an inflammatory cytokine that stimulates PP formation, is of particular interest. We confirmed decreased CCL5 expression by RT-PCR in our culture conditions (Wilcoxon test, p<0.05). Our results suggest that ANA alters both, actin and tubulin cytoskeleton. In addition, we confirm decreased CCL5 expression, which could be related to cytoskeletal alterations during thrombopoiesis under ANA treatment.
Fil: Cellucci, Adela Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Lev, Paola Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Yañuk Danila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Goette, Nora Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
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Fil: de Luca, Geraldine. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Lira MC. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Baroni Pietto, Maria Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Heller, Paula Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Marta, Rosana Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
LXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología & 3er Congreso Franco Argentino de Inmunología; Reunión Anual 2022 de la Sociedad Argentina de Fisiología
Mar del Plata
Argentina
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
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Sociedad Argentina de Fisiología
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Nivel de accesibilidad
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This group was further analyzed with Cytoscape v3.8.1 (ClueGo plugin) to build a visualization network of associated biological processes. From three groups detected, the one corresponding to Positive regulation of phospholipase activity showed topological characteristics that suggest high number of processes with potential relevance in MK. Within this group, CCL5, an inflammatory cytokine that stimulates PP formation, is of particular interest. We confirmed decreased CCL5 expression by RT-PCR in our culture conditions (Wilcoxon test, p<0.05). Our results suggest that ANA alters both, actin and tubulin cytoskeleton. In addition, we confirm decreased CCL5 expression, which could be related to cytoskeletal alterations during thrombopoiesis under ANA treatment.Fil: Cellucci, Adela Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Lev, Paola Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Yañuk Danila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Goette, Nora Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaFil: Glembotsky, Ana Claudia. 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Instituto de Investigaciones Médicas; ArgentinaLXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología & 3er Congreso Franco Argentino de Inmunología; Reunión Anual 2022 de la Sociedad Argentina de FisiologíaMar del PlataArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaSociedad Argentina de InmunologíaSociedad Argentina de FisiologíaFundación Revista Medicina2022info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/conferenceObjectReuniónJournalhttp://purl.org/coar/resource_type/c_5794info:ar-repo/semantics/documentoDeConferenciaapplication/pdfapplication/vnd.openxmlformats-officedocument.wordprocessingml.documentapplication/vnd.openxmlformats-officedocument.wordprocessingml.documentapplication/vnd.openxmlformats-officedocument.wordprocessingml.documentapplication/vnd.openxmlformats-officedocument.wordprocessingml.documentapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11336/260671Effect of anagrelide on megakaryocytic cytoskeleton during platelet production. 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Fil: Cellucci, Adela Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Médicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
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LXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología & 3er Congreso Franco Argentino de Inmunología; Reunión Anual 2022 de la Sociedad Argentina de Fisiología
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