Determinación de polimorfismos de nucleótido simple (SNP) de las citoquinas TNF y TGFB1 y su expresión en pacientes con Mielofibrosis(MF)

Autores
Camacho Rodríguez, Maria Fernanda; Bestach, Yesica Soledad; Toloza, Maria Jazmin Ayelen; Moiraghi, B.; Gonzalez, J.; Castro Ríos, Miguel; Heller, P.; Enrico, A.; Larripa, Irene Beatriz; Belli, Carolina Bárbara
Año de publicación
2019
Idioma
español castellano
Tipo de recurso
documento de conferencia
Estado
versión publicada
Descripción
La MF es una Neoplasia Mieloproliferativa Crónica caracterizada por el aumento de los linajes mieloide y megacariocítico, que tiene como resultado la liberación excesiva de plaquetas y citoquinas en la médula, estimulando la formación de tejido fibroso. Los genes que codifican las citoquinas TNF, IFN, IL-6 y TGFB-1, involucradas en los mecanismos fisiopatológicos de la enfermedad, poseenpolimorfismos asociados a la regulación de su expresión, los cuales podrían estar relacionados con susceptibilidad. Objetivos: Identificar la frecuencia genotípica y alélica de los polimorfismos -308 G/A del gen TNF, -1347 C/T del gen TGFB1 y -174 G/C del gen IL6, y sus niveles de expresión en pacientes con MF. Material y métodos: En el análisis de polimorfismos se evaluaron un total de 59 pacientes con Mielofibrosis (edad Mdn: 65 años; F/M: 32/27) y, como población control, 126 (TNF y IL6) y 46 (TGFB1) individuos sanos (edad Mdn: 40 años; F/M: 54/72 y edad Mdn: 51 años; F/M: 20/26 respectivamente). La detección se realizó a partir de ADN genómico mediante las técnicas HRM y PCR-RFLP para TNF, PCR-alelo específica para IL6 y PCR con Sondas TaqMan® para IL6 y TGFB1. La expresión de los genes de interés por PCR en tiempo real fue evaluada en 20 pacientes y 24 controles de las mismas muestras mencionadas, y calculada por el método comparativo 2-ddCTrespecto al gen control GAPDH. Los datos fueron analizados utilizando el programa estadístico InfoStat versión 2008 y fueron considerados significativo los valores de p <0.05. Resultados: Las frecuencias genotípicas del polimorfismo -308 G/A del gen TNF fueron: A/A=1.69%, G/A=27.12% y G/G=71.19% en MF vs A/A=0.79%, G/A=10.32% y G/G=88.89% en la población control, identificando diferencias estadísticamente significativas en la distribución de genotipos (Chi Cuadrado p=0,0108). Además, la frecuencia del alelo A, asociada con una alta expresión de TNF, se encuentra triplicada en los pacientes con MF respecto a la población control (MF 15% vs Controles 6%, test exacto de Fisher p=0.0036, OR: 3.24). No se encontraron diferencias significativas al comparar las frecuencias genotípicas de la población de pacientes y controles, para los SNP -174 G/C del gen IL6 (expresión alta [G/G]: MF 47.46% vs Controles 50%, test exacto de Fisher p=0.7552) y el -1347 C/T del gen TGFB1 (expresión alta [T/T]: MF 23.73% vs Controles 26.09%, test exacto de Fisher p=0.8224). Tampoco se observaron diferencias en las frecuencias alélicas (test exacto de Fisher p=0.7516 y p=0.6699, respectivamente). En relación a la expresión de la citoquina pro-inflamatoria de TNF, los pacientes muestran un aumento significativo superior a tres veces (Mann-Whitney p<0.0001), mientras que, TGFB1 se encuentra disminuido a la mitad (Mann-Whitney p<0.0566) en comparación con la población control. Conclusiones: Los análisis obtenidos, en este estudio preliminar, confirman la importancia de TNF como marcador de susceptibilidad favoreciendo el contexto proinflamatorio, caracterizado por niveles elevados de esta citoquina y niveles disminuidos de TGF- 1. Se espera continuar con el estudio de otras citoquinas, a fin de definir el rol de TGF- 1 en esta patología.
Fil: Camacho Rodríguez, Maria Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
Fil: Bestach, Yesica Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
Fil: Toloza, Maria Jazmin Ayelen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
Fil: Moiraghi, B.. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Agudos "Ramos Mejía"; Argentina
Fil: Gonzalez, J.. Gobierno de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Hospital General de Agudos Carlos Durand; Argentina
Fil: Castro Ríos, Miguel. No especifíca;
Fil: Heller, P.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas; Argentina
Fil: Enrico, A.. Hospital Italiano de La Plata; Argentina
Fil: Larripa, Irene Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
Fil: Belli, Carolina Bárbara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
XXIV Congreso Argentino de Hematología
Mendoza
Argentina
Sociedad Argentina de Hematología
Materia
Mielofibrosis
Citoquinas
Polimorfismos
Expresión
Nivel de accesibilidad
acceso abierto
Condiciones de uso
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CONICET Digital (CONICET)
Institución
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Los datos fueron analizados utilizando el programa estadístico InfoStat versión 2008 y fueron considerados significativo los valores de p <0.05. Resultados: Las frecuencias genotípicas del polimorfismo -308 G/A del gen TNF fueron: A/A=1.69%, G/A=27.12% y G/G=71.19% en MF vs A/A=0.79%, G/A=10.32% y G/G=88.89% en la población control, identificando diferencias estadísticamente significativas en la distribución de genotipos (Chi Cuadrado p=0,0108). Además, la frecuencia del alelo A, asociada con una alta expresión de TNF, se encuentra triplicada en los pacientes con MF respecto a la población control (MF 15% vs Controles 6%, test exacto de Fisher p=0.0036, OR: 3.24). 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Conclusiones: Los análisis obtenidos, en este estudio preliminar, confirman la importancia de TNF como marcador de susceptibilidad favoreciendo el contexto proinflamatorio, caracterizado por niveles elevados de esta citoquina y niveles disminuidos de TGF- 1. Se espera continuar con el estudio de otras citoquinas, a fin de definir el rol de TGF- 1 en esta patología.Fil: Camacho Rodríguez, Maria Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Bestach, Yesica Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Toloza, Maria Jazmin Ayelen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. 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Fil: Camacho Rodríguez, Maria Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
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Fil: Toloza, Maria Jazmin Ayelen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
Fil: Moiraghi, B.. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Agudos "Ramos Mejía"; Argentina
Fil: Gonzalez, J.. Gobierno de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Hospital General de Agudos Carlos Durand; Argentina
Fil: Castro Ríos, Miguel. No especifíca;
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Fil: Larripa, Irene Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina
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XXIV Congreso Argentino de Hematología
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