Mecanismos moleculares de regulación de la sensibilidad a glucocorticoides por las citoquinas

• Autores: Costas, Mónica Alejandra
• Año de publicación: 1996
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Arzt, Eduardo Simón
• Materia: CYTOKINES; TNF-ALFA-GLUCOCORTICOID RECEPTOR; GLUCOCORTICOID RESPONDING ELEMENT; APOPTOSIS
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Las citoquinas inducen la producción de glucocorticoides (GC), los cuales inhiben la producción de citoquinas y sus acciones biológicas, protegiendo al organismo de una respuesta inmune exacerbada. Se observó que el factor de necrosis tumoral-a (TNF-a) aumentó la actividad transcripcional inducida por GC vía elementos respondedores a GC (GRE) en fibroblastos de ratón L-929 transfectadas con un plásmido reporter inducible por GC. Además, TNF-a aumentó el número de receptores para GC (GR) y la actividad transcripcional en el promotor de GR (HGRP) en células L-929 transfectadas con un plásmido reporter HGRP. TNF-a no tuvo efecto en células que no expresan GR pero que sí expresan receptores para TNF-a, aunque, el efecto fue evidente cuando estas células fueron cotransfectadas con un vector de expresión para GR. Estas acciones ponen de manifiesto, que TNF-a puede aumentar la actividad transcripcional de GR en respuesta a GC independientemente del aumento en el número de GR. Más aún, TNF-a aumentó la unión de GR a GRE. Como correlato biológico de estos efectos, un priming (preincubación) de TNF-a (dosis baja, no citotóxica) aumentó significativamente la sensibilidad a la acción inhibitoria de los GC sobre la citotoxicidad/apoptosis inducida por TNF-a en las células L-929. TNF-a e IL-1b tuvieron el mismo efecto estimulatorio sobre la actividad transcripcional de GR en distintos tipos celulares (glioma, epiteliales, hipofisiarias). Concluimos que, las citoquinas, pueden modular la acción de los GC a nivel molecular aumentando la sensibilidad a sus efectos reguladores en la célula blanco.
Cytokine-induced glucocorticoid secretion and glucocorticoid inhibition of cytokine synthesis and pleiotropic actions act as important safeguards in preventing cytokine over-reaction. We found that tumor necrosis factor-a (TNF-a) increased glucocorticoid-induced transcriptional activity of the glucocorticoid receptor (GR) via the glucocorticoid response elements (GRE) in L-929 mouse fibroblasts transfected with a glucocorticoid-inducible reporter plasmid. In addition, TNF-a also enhanced GR number and transcriptional activity on GR promoter (HGRP) in L-929 cells transfected with a HGRP reporter plasmid. The TNF-a effect on transcriptional activity was absent in other cell lines that express TNF-a receptors but not GRs, and became manifest when a GR expression vector was cotransfected, indicating that TNF-a, independent of any effect it may have on GR number, has a stimulatory effect on the glucocorticoid-induced transcriptional activity of the GR. Moreover, TNF-a increased GR binding to GRE. As a functional biological correlate of this mechanism, priming of L-929 cells with a low (non-cytotoxic) dose of TNF-a significantly increased the sensitivity to glucocorticoid inhibition of TNF-a-induced cytotoxicity/apoptosis. TNF-a and IL-1b had the same stimulatory action on glucocorticoid-induced transcriptional activity of the GR via the GRE, in different types of cytokine/glucocorticoid target cells (glioma, pituitary, epithelioid). The phenomenon may therefore reflect a general molecular mechanism whereby cytokines modulate the transcriptional activity of the GR, thus potentiating the counter-regulation by glucocorticoids at the level of their target cells.
Fil: Costas, Mónica Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.