Factores extracelulares de Rhizobium leguminosarum y su rol en la formación de biofilms

• Autores: Russo, Daniela Marta
• Año de publicación: 2006
• Idioma: español castellano
• Tipo de recurso: tesis doctoral
• Colaborador/a o director/a de tesis: Zorreguieta, Angeles
• Materia: RHIZOBIUM; BIOFILMS; SECRECION; ADHESION; EXOPOLISACARIDOS(EPS); LIPOPOLISACARIDO(LPS); ADHESINAS; RHIZOBIUM; BIOFILMS; PROTEIN SECRETION; ADHESION; EXOPOLYSACCHARIDES(EPS); LIPOPOLYSACCHARIDE(LPS); ADHESINS
• Institución: Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Esta tesis aporta conocimientos sobre el rol de factores extracelulares producidos por la bacteria fijadora de nitrógeno Rhizobium leguminosarum bv. viciae en la formación de biofilms. Los rizobios se unieron a un soporte abiótico a través de un polo, formando microcolonias y agregados tipo racimo, que culminaron en una estructura tridimensional característica (biofilm) con grupos de bacterias igualmente orientadas. El EPS acídico y el antígeno O del LPS fueron esenciales desde las etapas tempranas (adhesión al soporte y formación de microcolonias). Las EPS-glicanasas PlyA y PlyB, secretadas por el sistema tipo I PrsD-PrsE, influyeron en la maduración del biofilm clivando el EPS. El sistema PrsD-PrsE resultó ser responsable de la secreción de adhesinas tipo Rap, que participarían en las interacciones entre bacterias durante la formación del biofilm. La producción de fibrillas de celulosa estaría reprimida en las cepas estudiadas, aunque la inducción de su síntesis ante determinados estímulos podría influir fuertemente en la agregación celular. Dentro de otro objetivo de esta Tesis, se identificaron los genes de los componentes ABC y MFP de un nuevo sistema de secreción de proteínas tipo I, codificado en el plásmido simbiótico pRL1JI. Este sería responsable de exportar la proteína extracelular EP49, cuya secuencia codificante es contigua. EP49, presentó varias repeticiones de un nonapéptido característico de proteínas de la familia de toxinas RTX, como la rizobiocina A y la proteína formadora de poro NodO de Rhizobium lo que sugiere que interaccionaría con Ca^2+.
This Thesis contributes to the knowledge of the role of extracellular factors produced by nitrogen-fixing Rhizobium leguminosarum bv. viciae in biofilm development. Rhizobial attachment to an abiotic surface starts with polar interactions with the surface generating microcolonies and cellular aggregation. Aggregate formation progresses to a typical three-dimensional structure of bacterial clusters. The acidic EPS and the O-antigen of the LPS participate from early stages of biofilm formation (surface adhesion and microcolony establishment). The EPS-glycanases PlyA and PlyB, secreted by PrsD–PrsE type I secretion system influence biofilm maturation by EPS processing. The PrsD-PrsE system was also involved in the secretion of Rap adhesins, which may also participate in bacterial interactions. Cellulose fibrils production seems to be repressed in the Rhizobium leguminosarum strains used in this work; however, induction of its synthesis under certain conditions could strongly influence cellular aggregation. Pursuing other objective of this Thesis, ABC and MFP components of a new type I protein secretion system was identified. These components are encoded by a locus within the pRL1JI symbiotic plasmid and are responsible for the secretion of the extracellular protein EP49, that is encoded downstream of the secretion locus. Several nonapeptide repeats that belong to the RTX toxins family were found in the coding sequence of EP49. These repeats are also present in the rhizobiocin A and the NodO pore forming protein of Rhizobium suggesting that EP49 is a Ca^2+ binding protein.
Fil: Russo, Daniela Marta. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.