Biophysical Characterization of the Membrane-proximal Ectodomain of the Receptor-type Protein-tyrosine Phosphatase Phogrin

Authors
Noguera, Martín Ezequiel; Primo, Maria Evangelina; Sosa, Laura Natalia Fidela; Risso, Valeria Alejandra; Poskus, Edgardo; Ermacora, Mario Roberto
Publication Year
2013
Language
English
Format
article
Status
Published version
Description
The receptor-type protein-tyrosine phosphatase (RPTP) phogrin is localized at the membrane of secretory granules of pancreatic islet ;-cells and, similarly to the closely related ICA512, plays a role in the regulation of insulin secretion, in ensuring proper granulogenesis and stability, and in the regulation of -cell growth. The mature membraneproximal ectodomain of phogrin (MPE phogrin) was produced as a recombinant protein and characterized. CD, fluorescence, controlled proteolysis, size-exclusion chromatography, and multi-angle light scattering showed that it is a properlyfolded monomeric domain. Equilibrium experiments, in the presence of guanidinium chloride and thermal unfolding, suggest a two-state mechanism with a G of 2.3-3.3 kcal/mol, respectively. The study establishes common features and differences of MPE phogrin and the homologous ectodomain of ICA512. A homology model of phogrin was built based in the x-ray structure of MPE ICA512. The model is a starting point for modeling the entire receptor and for testing the quaternary structure and interactions of this protein in vivo. A description of the membrane insertion mode and putative interacting surfaces of this large protein is fundamental for the understanding of its biological function.
Fil: Noguera, Martín Ezequiel. Universidad Nacional de Quilmes; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular (i); Argentina
Fil: Primo, Maria Evangelina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Cienti­ficas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "Profesor R. A. Margni"; Argentina
Fil: Sosa, Laura Natalia Fidela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Cienti­ficas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "Profesor R. A. Margni"; Argentina
Fil: Risso, Valeria Alejandra. Universidad Nacional de Quilmes; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular (i); Argentina
Fil: Poskus, Edgardo. Consejo Nacional de Investigaciones Cientiâ­ficas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "profesor R. A. Margni"; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina
Fil: Ermacora, Mario Roberto. Universidad Nacional de Quilmes; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular (i); Argentina
Subject
Diabetes
equilibrium unfolding
homology modeling
phogrin
receptor-type protein-tyrosine phosphatase
secretory granule
Biofísica
Ciencias Biológicas
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
Access level
Restricted access
License
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
Repository
CONICET Digital (CONICET)
Institution
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
OAI Identifier
oai:ri.conicet.gov.ar:11336/8032