Autoanticuerpos anti-beta2 glicoproteína I y anti-protrombina humana. Su rol en la fisiopatología del síndrome antifosfolípido

Authors
Forastiero, Ricardo Raúl
Publication Year
1997
Language
Spanish
Format
doctoral thesis
Status
Published version
Director/a de tesis
Kordich, Lucía C.
Description
El síndrome antifosfolípido (SAF) se caracteriza por la asociación de trombosis venosa o arterial, pérdidas fetales recurrentes y/o trombocitopenia con la presencia de anticuerpos antifosfolípidos (aFL). La especificidad de estos anticuerpos por los fosfolípidos (FL) ha sido cuestionada en los últimos años y algunos datos experimentales indican la necesidad de ciertos cofactores protéicos para que ocurra la interacción entre los FL y los anticuerpos. La β2 glicoproteína I (β2GPI) y la protrombina (II) humana son las principales proteínas reconocidas como cofactores. Principales objetivos - desarrollar enzimoinmunoensayos (ELISA) para evaluar la presencia de anticuerpos anti-β2-GPI y anti-II en pacientes con aFL - estudiar si las inmunoglobulinas G (IgG) purificadas de pacientes con SAF poseen distinta especificidad antigénica que aquellas obtenidas de pacientes con sífilis. - evaluar la especificidad antigénica de los aFL en relación a las complicaciones clínicas del SAF - analizar la interferencia de los aFL sobre el sistema de la proteina C (PrC) y la biosíntesis de eicosanoidcs de origen plaquetario, como probables mecanismos fisiopatogénicos del SAF Resultados Se optimizaron las condiciones para la detección por ELISA de anticuerpos dirigidos contra β2GPI y II en ausencia de FL. La principal variable de los ensayos fue el tipo de superficie utilizada que junto con los datos de los experimentos de inhibición indicaron que los anticuerpos sólo reconocen a las proteínas cuando se presentan en una determinada conformación estmctural. Los anti-β2GPI y anti-II se detectaron con una frecuencia mucho mayor en los pacientes con enfermedades autoinmunes asociadas a los aFL (SAF y lupus eritematoso sistémico) que en pacientes con aFL sin complicaciones clínicas del SAF. Los estudios con IgG purificadas demostraron que los aFL asociados con sífilis reconocen epitopes en los FL y la mayoría de las IgGs obtenidas de pacientes con SAF reaccionan específicamente con la β2GPI y/o II. En el estudio retrospectivo de 233 pacientes con aFL se encontró que los anti-β2GPI-IgG y los anti-β2GPI-IgM a títulos moderados o fuertes eran factores de riesgo independientes para trombosis venosa y complicaciones obstétricas, respectivamente. Además, los anti-β2GPI se asociaron con el fenómeno adquirido de resistencia a la PrC activada y con la alteración en la biosíntesis de tromboxano plaquetario, reflejada en una mayor excreción urinaria del metabolito 11-dehidro-tromboxano B2. En conclusión la utilización de ensayos que nos permitan conocer la especificidad antigénica de los aFL podría ser de gran utilidad diagnóstica y permitir una mejor evaluación de los mecanismos patogénicos del SAF.
The antiphospholipid syndrome (APS) is characterized by the association of venous or arterial thrombosis, recurrent fetal loss and/or thrombocytopenia with the presence of antiphospholipid antibodies (aPL). In the last few years it has been questioned the specificity of these antibodies towards phospholipids (PL). Several studies have emphasized the involvement of some protein cofactors in the interaction between PL and aPL. β2 glycoprotein I (β2GPI) and human prothrombin (II) are the best characterized protein cofactors. Main objectives - to standardize enzyme-linked immunoassays (ELISA) in order to evaluate the presence of anti-β2GPI and anti-II in patients with aPL - to study if the purified immunoglobulins G (IgG) from APS patients differ in the antigenic specificity of those obtained from syphilis patients - to evaluate the relationship between the antigenic specificity and the clinical complications of the APS - to analize the interference of the aPL on the protein C system and the platelet biosynthesis of eicosanoids Results We have standardized the ELISA for the detection of anti-β2GPI and anti-II antibodies in the absence of PL. The experimental evidences on the requirement of a special surface in solid-phase assays and the results of the inhibition studies indicated that these antibodies do not recognize proteins unless they have underwent a conformational change. Patients with aPL from the autoimmune group (APS and systemic lupus erythematosus) had a higher prevalence of anti-β2GPI and anti-II antibodies than those from the group without APS-related clinical complications or with infectious diseases. Using purified IgG fractions, we found that aPL from syphilis react with epitopes exposed on PL but those from APS patients bind mainly to β2GPI and II. In the retrospective analysis performed in 233 patients with aPL, we found that only anti-β2GPI of IgG and anti-β2GPI of IgM isotype are independent risk factors for venous thrombosis and obstetric complications, respectively. It was found specially when taking into account antibodies at moderate or high titres. Anti-β2GPI antibodies were closely related to the acquired phenomenom of activated protein C resistance and to the interference on the platelet biosynthesis of eicosanoids, mainly reflected by a significant increase in the urinary excretion of 11-dehydro-thromboxane B2. In conclusion, the introduction of new assays in order to clarify the the antigens of the aPL could be an important tool in the diagnosis and the evaluation of the pathogenic mechanisms of the APS.
Fil:Forastiero, Ricardo Raúl. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.
Subject
ANTICUERPOS ANTIFOSFOLIPIDOS
ANTICUERPOS ANTI-ß2 GLICOPROTEINA I
ANTICUERPOS ANTIPROTROMBINA
COFACTORES PROTEICOS
SINDROME ANTIFOSFOLIPIDO
ANTIPHOSPHOLIPID ANTIBODIES
ANTI-ß2 GLYCOPROTEIN I ANTIBODIES
ANTI-PROTHROMBIN ANTIBODIES
PROTEIN COFACTORS
ANTIPHOSPHOLIPID SYNDROME
Access level
Open access
License
http://creativecommons.org/licenses/by/2.5/ar
Repository
Biblioteca Digital (UBA-FCEN)
Institution
Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
OAI Identifier
tesis:tesis_n2937_Forastiero