Alteraciones proteicas debidas al estrés oxidativo promovido por la activación del tetracloruro de carbono a radicales libres

Authors
Galelli, Mirta Esther
Publication Year
2000
Language
Spanish
Format
doctoral thesis
Status
Published version
Director/a de tesis
Castro, José Alberto
Description
El CCl4 afectó a proteínas por distintos mecanismos. In vivo disminuyó transitoriamente la incorporación de (14)C-Leucina a proteínas nucleares (totales y distintas fracciones proteicas) y microsomales hepáticas de rata, siendo el efecto máximo a la hora. La cicloheximida causó un efecto similar. Los metabolitos reactivos del CCl4 (tridonometilo ('CCl3) y triclorometilperoxilo (CCl3O2')) formados por activacióncon luz ultravioleta C (UVC)causaron el aumento de grupos carbonilos (↑CO)y la disminución del contenido de grupos sulfhidrilo (↓SH) en albúmina de huevo (alb) y el ↑CO en 20 aminoácidos. El ↑CO en alb fue parcialmente inhibido por Trolox y EDTA pero no α-tocoferol. Los metabolitos del CCl4;formaron HCCl3 por reacción con alb (parcialmente inhibido por Trolox) y cisteína, posiblemente por abstracción de hidrógeno, la luz UVC per se ↑CO,abrió el puente disulfuro, pero casi no afectó los SH de la alb. El 'CCl3 y el CCl3O2 ↑CO y ↓SH en proteínas microsomales in vitro, por acción directa o vía productos de peroxidación de lípidos (PL) ya que fue parcialmente inhibido por antioxidantes y EDTA. No afectaron los CO y SH de proteínas nucleares, mitocondriales y citosólicas in vitro. El NADPH in vitro (probablemente vía PL) ↑CO y ↓SH de proteínas microsomales y nucleares, pero no mitocondriales Produjo ↑SH pero no de CO de compustos citosólicos. El CCl4 in vivo aumentó transitoriamente el contenido de CO de proteínas microsomales pero no de nucleares hepáticas de rata. Las alteraciones causadas por los metabolitos reactivos del CCl4 en proteínas permitirían explicar algunas de las alteraciones observadas en la intoxicación por CCl4(pérdida de funciones celulares, daño a la bomba de calcio del retículo endoplásmico),que podrían causar la muerte o desencadenar mecanismos de protección celulares.
CCI4 affected proteins through different mechanisms. It temporarily decreased 14C-Leucine incorporation into both, nuclear proteins (total and different protein fractions) and microsomal proteins in vivo. The main effect was observed at 1-hour poisoning. The effect of cicloheximide on 14C-Leu incorporation was similar to that of CCl4. Trichloromethyl (CCl3) and trichloromethylperoxyl (CCl3O2') free radicals generated by ultraviolet C light (UVC) activation of CCl4 promoted both, carbonyl formation (COT) and sulfhydryl decrease (SH↓) in chicken egg albumin (alb) and CO↑ in the common 20 amino acids. They also led to HCCb formation from alb (partially inhibited by Trolox)and cysteine, probably by hydrogen abstraction. The CO↑ in alb was partially prevented by Trolox and EDTA,but not by α-tocopherol. UVC light by itself caused CO↑,opened disulfide bonds, but it did not affect SH in alb. 'CCl3 and CCl3O2 CO↑ and SH↓ in microsomal proteins in vitro. These effects were partially prevented by antioxidants and EDTA,which indicates these could be due to both, CCl4-free radical direct action or lipid peroxidation products (PL). CCl4-free radicals did not affect CO and SH in nuclear, mitochondrial and citosolic proteins in vitro.NADPH in vitro (probably through PL) caused CO↑ and ↓SH in microsomal and nuclear but not in mitochondrial proteins.It also produced SH increase but not CO↑ in citosolic substances. CCl4 in vivo caused a transitory CO↑ in rat liver microsomal but not in nuclear proteins. These CCl4-induced alterations might explain some of the effects of this hepatotoxin (for example, cellular function loss or damage to microsomal calcium pump) that might induce cellular death or trigger cellular protection mechanisms.
Fil:Galelli, Mirta Esther. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.
Subject
TETRACLORURO DE CARBONO
RADICALES LIBRES
SINTESIS DE PROTEINAS
PROTEINAS NUCLEARES
OXIDACION DE PROTEINAS
CARBONILOS PROTEICOS
SULFHIDRILOS PROTEICOS
PEROXIDACION DE LIPIDOS
UVC
CARBON TETRACHLORIDE
FREE RADICALS
PROTEIN SYNTHESIS
NUCLEAR PROTEINS
PROTEIN OXIDATION
PROTEIN CARBONYL
PROTEIN SULFHYDRYL
LIPID PEROXIDATION
UVC
Access level
Open access
License
http://creativecommons.org/licenses/by/2.5/ar
Repository
Biblioteca Digital (UBA-FCEN)
Institution
Universidad Nacional de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
OAI Identifier
tesis:tesis_n3233_Galelli